ھايۋانلارنىڭ ئومۇمىي RNA ئايرىۋېتىش زاپچاسلىرى ھايۋانلارنىڭ توقۇلمىلىرى ۋە ھۈجەيرىسى ئۈچۈن RNA ئېلىش ۋە تازىلاش قوراللىرى
Kits Description
50 Preps, 200 Preps
بۇ يۈرۈشلۈك دېتالنى ئىشلىتىدۇئايلانما ئىستون ۋە فورمۇلاشىركىتىمىز تەرىپىدىن ئىجاد قىلىنغان ، ئۇ يۇقىرى ئۈنۈملۈك ۋە ھەر خىل ھايۋان توقۇلمىلىرىدىن يۇقىرى ساپلىق ۋە يۇقىرى سۈپەتلىك ئومۇمىي RNA نى چىقىرىپ تاشلىيالايدۇ. ئۇ ئۈنۈملۈك DNA تازىلاش تۈۋرۈكى بىلەن تەمىنلەيدۇ ، ئۇ گېن گۇرۇپپىسىنى خاسىيەتلىك ۋە توقۇلما لىماتتىن ئاسانلا ئايرىيالايدۇ ۋە ئېلان قىلالايدۇ ، ئاددىي ۋە ۋاقىت تېجەيدۇ.پەقەت RNA تۈۋرۈكى RNA نى ئۈنۈملۈك باغلىيالايدۇ ھەمدە ئۆزگىچە فورمۇلا بىلەن بىرلا ۋاقىتتا بىر تەرەپ قىلغىلى بولىدۇ.
پۈتكۈل سىستېما RNase-Free بولۇپ ، چىقىرىۋېتىلگەن RNA بۇزۇلمايدۇ.Buffer RW1 ، Buffer RW2 بۇففېر يۇيۇش سىستېمىسى ، شۇڭا ئېرىشكەن RNA ئاقسىل ، DNA ، ئىئون ۋە ئورگانىك بىرىكمىلەرنىڭ بۇلغىنىشىدىن خالىي بولىدۇ.
يۈرۈشلۈك زاپچاسلار
ھايۋانلارنىڭ ئومۇمىي RNA ئايرىمىسى | ||
يۈرۈشلۈك زاپچاسلار | RE-03011 | RE-03014 |
50 T. | 200 T. | |
Buffer RL1 * | 25ml | 100ml |
Buffer RL2 | 15ml | 60ml |
Buffer RW1 * | 25ml | 100ml |
Buffer RW2 | 24ml | 96ml |
RNase-free ddH2O | 10ml | 40ml |
پەقەت RNA تۈۋرۈكى | 50 | 200 |
DNA- تازىلاش ئىستونى | 50 | 200 |
كۆرسەتمە قوللانمىسى | 1 پارچە | 1 پارچە |
مەھسۇلات ئۇچۇرى
فورماتى | ئايلانما ئىستون | ساپلاشتۇرۇش زاپچاسلىرى | ئالدى ئىستون ، رېئاكتىپ |
Flux | 1-24 ئەۋرىشكە | ھەر بىر تەييارلىق ۋاقتى | ~ 30 مىنۇت (24 ئەۋرىشكە) |
Centrifuge | ئۈستەل مەركىزى | Pyrolysis ئايرىش | مەركەزدىن ئايرىلىش |
ئۈلگە | ھايۋان توقۇلمىلىرىcell | ئەۋرىشكە سانى | توقۇلما: 10-20 mg;ھۈجەيرە: (1-5) × 106 |
Elution volume | 50-200 μL | يۈكنىڭ ئەڭ چوڭ مىقدارى | 850 μL |
ئالاھىدىلىكى ۋە ئەۋزەللىكى
R RNA نىڭ ناچارلىشىشىدىن ئەنسىرەشنىڭ ھاجىتى يوق.پۈتكۈل سىستېما RNase-Free
D DNA نى ئىشلىتىپ DNA تازىلاش تۈۋرۈكىنى ئۈنۈملۈك ئۆچۈرۈڭ
D DNase نى قوشماي DNA نى ئېلىڭ
■ ئاددىي مەشغۇلاتلارنىڭ ھەممىسى ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا تاماملىنىدۇ
■ تېز مەشغۇلات 30 مىنۇتتا تاماملىنىدۇ
■ بىخەتەر بولمىغان ئورگانىك رېئاكتور تەلەپ قىلىنمايدۇ
■ يۇقىرى ساپلىق -OD260 / 280≈1.8-2.1
Kit application
ئۇ ھەر خىل يېڭى ياكى توڭلىتىلغان ھايۋان توقۇلمىلىرى ياكى مەدەنىيەتلىك ھۈجەيرىلەردىن ئومۇمىي RNA نى چىقىرىش ۋە تازىلاشقا ماس كېلىدۇ.
مەھسۇلات پارامېتىرلىرى
■ تۆۋەن ئېقىمدىكى قوللىنىشچان پروگراممىلار: بىرىنچى قاتاردىكى cDNA بىرىكتۈرۈش ، RT-PCR ، مولېكۇلا كلونلاش ، شىمالىي بۆلەك قاتارلىقلار.
■ ئەۋرىشكە: ھايۋان توقۇلمىلىرى ، مەدەنىيەتلىك ھۈجەيرىلەر
■ مىقدارى: توقۇلمىلار 10-20mg ، ھۈجەيرىلەر (2-5) × 106
Pur ساپلاشتۇرۇش تۈۋرۈكىنىڭ ئەڭ چوڭ DNA باغلاش ئىقتىدارى: 80 mg
Ulation Elution volume: 50-200 μl
دىئاگرامما
ھايۋانلارنىڭ ئومۇمىي RNA ئايرىمىسى 20mg
يېڭى چاشقىنەك ئەۋرىشكىسى ،% 5 ساپلاشتۇرۇلغان RNA% 1 ئاگارنى ئېلىڭ
گلىكوگېل ئېلېكتروفورىسى
1: تال 2: بۆرەك
3: جىگەر 4: يۈرەك
ساقلاش ۋە ساقلاش مۇددىتى
بۇ زاپچاسنى ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا (15-25 ℃) ياكى 2 ~ 8 at ئۇزۇن ۋاقىت ساقلىغىلى بولىدۇ.بۇففېر RL1 mer- mercaptoethanol (ئىختىيارىي) نى قوشقاندىن كېيىن 4 at 1 ئاي ساقلىغىلى بولىدۇ.
نەقىل ئېلىنغان ماقالىلەر
1.IF: 18.808:جېڭ ، Q ، چىن ، F. ، لو ، ر. قاتارلىقلار.مەركىزىي بىرىكمە لايىھەنى ئەلالاشتۇرۇش ئارقىلىق جىگەر بازىسىنى تەھرىرلەش ئۈچۈن mRNA قاچىلانغان مايغا ئوخشايدىغان نانو ئېلېمېنتى.ئادۋوكات.فۇنكسىيە.Mater.2021 ، 31 ، 2011068.doi: 10.1002 / adfm.202011068.
2.IF: 18.187:ئۇ X ، خوڭ ۋ ، ياڭ ج قاتارلىقلار.داۋالاش غول ھۈجەيرىسىنى تەييارلاشتىكى ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆزلۈكىدىن ئاپتوماتىك فوسفاتىدسىلسىن قويۇپ بېرىش ئارقىلىق ئىممۇنىتېتنى كونترول قىلىش رولى بار.سىگنال يەتكۈزۈش نىشان تېر.2021-يىلى 7-ئاينىڭ 14-كۈنى ؛ 6 (1): 270.doi: 10.1038 / s41392-021-00688-z.
3.IF: 17.97: دەي Z ، ليۇ H ، لياۋ ج قاتارلىقلار.N7-Methylguanosine tRNA نىڭ ئۆزگىرىشى ئون خىل گېننىڭ mRNA تەرجىمىسىنى كۈچەيتىپ ، ئۈچەيدىكى خولانگىيوكاركېنوما ئۆسۈشىنى ئىلگىرى سۈرىدۇ.مول ھۈجەيرە.2021-يىلى 7-ئاينىڭ 29-كۈنى: S1097-2765 (21) 00555-4.doi: 10.1016 / j.molcel.2021.07.003.
4.IF: 9.225: ساۋ X ، شۇ ي ، چېن ي قاتارلىقلار.Mettl14- ئوتتۇراھال m6A ئۆزگەرتىش بالىياتقۇ ئىچكى پەردىسى ئۆسمىسىنى ساقلاپ قېلىش ئارقىلىق جىگەرنىڭ ئەسلىگە كېلىشىنى ئاسانلاشتۇرىدۇ.ھۈجەيرە مول Gastroenterol Hepatol.2021 ؛ 12 (2): 633-651.doi: 10.1016 / j.jcmgh.2021.04.001.
RNA ئايرىلىش زاپچاسلىرى باشقا ئەۋرىشكە مەنبەلىرىare available:
ھۈجەيرە ، ئۆسۈملۈك ، ۋىرۇس ، قان قاتارلىقلار.
RNA ئېلىنمايدۇ ياكى RNA نىڭ مەھسۇلات مىقدارى تۆۋەن
ئەسلىگە كەلتۈرۈش ئۈنۈمىگە تەسىر كۆرسىتىدىغان ھەر خىل ئامىللار دائىم بار ، مەسىلەن: توقۇلما ئەۋرىشكىسى RNA مەزمۇنى ، مەشغۇلات ئۇسۇلى ، يوقىتىش مىقدارى قاتارلىقلار.
1. مەشغۇلات جەريانىدا مۇز مۇنچىسى ياكى كرىگېن (4 سېلسىيە گرادۇس) مەركەزدىن قاچۇرۇش ئېلىپ بېرىلدى.
تەۋسىيە: پۈتكۈل جەرياندا ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا (15-25 سېلسىيە گرادۇس) مەشغۇلات قىلىڭ ، تۆۋەن تېمپېراتۇرىدا مۇز مۇنچا ۋە مەركەزدىن قاچۇرماڭ.
2. ئەۋرىشكە ساقلاشنىڭ مۇۋاپىق بولماسلىقى ياكى ئەۋرىشكەنىڭ ساقلاش ۋاقتى ھەددىدىن زىيادە.
تەۋسىيە: ئەۋرىشكىلەرنى -80 سېلسىيە گرادۇستا ساقلاڭ ياكى سۇيۇق ئازوتتا توڭلىتىڭ ھەمدە قايتا-قايتا توڭلىتىشتىن ساقلىنىڭ.RNA ئېلىش ئۈچۈن يېڭى توقۇلمىلار ياكى مەدەنىيەتلىك ھۈجەيرىلەرنى ئىشلىتىپ بېقىڭ.
3. ئەۋرىشكە لايزىسى يېتەرلىك ئەمەس.
تەۋسىيە: توقۇلمىلارنى بىرلىككە كەلتۈرگەندە ، توقۇلمىلارنىڭ يېتەرلىك بىرىكتۈرۈلگەنلىكىگە ۋە توقۇلما ھۈجەيرىلەرنىڭ يېتەرلىك بۆلۈنۈپ RNA نىڭ قويۇپ بېرىلىشىنى چۈشەندۈرۈڭ.
4. تالانت ئىگىسى توغرا قوشۇلمايدۇ.
تەۋسىيە: RNase-ddH نى جەزملەشتۈرۈڭ2O ساپلاشتۇرۇش تۈۋرۈكىنىڭ ئوتتۇرىسىغا تۆۋەنگە قوشۇلىدۇ.
5. مۇتلەق ئېتانولنىڭ توغرا ھەجىمى Buffer RL2 ياكى Buffer RW2 غا قوشۇلمىدى.
تەۋسىيە: كۆرسەتمىگە ئەمەل قىلىڭ ، بۇففېر RL2 ۋە Buffer RW2 غا توغرا مىقداردىكى مۇتلەق ئېتانول قوشۇڭ ھەمدە زاپچاسنى ئىشلىتىشتىن بۇرۇن ياخشى ئارىلاشتۇرۇڭ.
6. توقۇلما ئەۋرىشكە مىقدارى مۇۋاپىق ئەمەس.
تەۋسىيە: 10-20 مىللىگىرام توقۇلما ياكى (1-5) × 10 نى ئىشلىتىڭ6ھەر 500 مىللىمېتىرلىق بۇففېر RL1 دىكى ھۈجەيرىلەر ، توقۇلمىلارنى ھەددىدىن زىيادە ئىشلىتىش RNA ئېلىشنى ئازايتىدۇ.
7. چىقىرىۋېتىش ھەجىمى ياكى تولۇق بولمىغان تولۇقلاش.
تەۋسىيە: تازىلاش تۈۋرۈكىنىڭ سۈزۈش مىقدارى 50-200 مىللىمېتىر.ئەگەر يوقىتىش ئۈنۈمى قانائەتلىنەرلىك بولمىسا ، قىزىغان RNase-Free ddH نى قوشقاندىن كېيىن ئۆينىڭ تېمپېراتۇرىسىنى ئورۇنلاشتۇرۇش ۋاقتىنى ئۇزارتىش تەۋسىيە قىلىنىدۇ.2O ، مەسىلەن 5-10 مىنۇت.
8. تازىلاش تۈۋرۈكىدە Buffer RW2 يۇيۇلغاندىن كېيىن ئېتانول قالدۇقى بار.
تەۋسىيە: ئەگەر بۇففېر RW2 يۇيۇلغاندىن كېيىن ئېتانول قالدۇقى بولسا ، 1 مىنۇت قۇرۇق تۇرۇبا مەركەزدىن قاچۇرۇش بولسا ، قۇرۇق نەيچە مەركەزدىن قاچۇرۇش مەشغۇلاتىنى 2 مىنۇتقا ئۇزارتقىلى بولىدۇ ، ياكى تازىلاش تۈۋرۈكىنى ئۆي تېمپېراتۇرىسىغا 5 مىنۇت قويۇپ ، قالدۇق ئېتاننى يېتەرلىك ئېلىۋەتكىلى بولىدۇ.
ساپلاشتۇرۇلغان RNA بۇزۇلغان
ساپلاشتۇرۇلغان RNA نىڭ سۈپىتى ئەۋرىشكىنى ساقلاش ، RNase بۇلغىنىش ۋە كونترول قىلىش قاتارلىق ئامىللار بىلەن مۇناسىۋەتلىك.
1. توقۇلما ئەۋرىشكىسى ۋاقتىدا ساقلانمايدۇ.
تەۋسىيە: ئەگەر توقۇلمىلار ئەۋرىشكىسى ياكى ھۈجەيرىلەر يىغىۋېلىنغاندىن كېيىن ۋاقتىدا ئىشلىتىلمىسە ، دەرھال -80 سېلسىيە گرادۇس ياكى سۇيۇق ئازوتتا كىرىستال ساقلاش كېرەك.RNA ئېلىش ئۈچۈن ، ئىمكانقەدەر يېڭى ئېلىنغان توقۇلما ياكى ھۈجەيرە ئەۋرىشكىسىنى ئىشلىتىڭ.
2. توقۇلما ئەۋرىشكىسىنى قايتا-قايتا توڭلىتىش.
تەۋسىيە: توقۇلما ئەۋرىشكىسىنى ساقلىغاندا ، ئەڭ ياخشىسى ئۇنى كىچىك پارچىلارغا بۆلۈپ ساقلاپ ساقلاش كېرەك ، ئىشلەتكەندە پارچىدىن بىرنى ئېلىۋېتىپ ، ئەۋرىشكىنىڭ قايتا-قايتا مۇزلاپ كېتىشى ۋە RNA نىڭ بۇزۇلۇشىدىن ساقلىنىش كېرەك.
3. RNase مەشغۇلات جەريانىدا بىر قېتىم ئىشلىتىلىدىغان پەلەي ، ماسكا قاتارلىقلارنى تونۇشتۇرمايدۇ ياكى كىيمەيدۇ.
تەۋسىيە: RNA ئېلىش تەجرىبىسى ئەڭ ياخشىسى RNA كونترول قىلىش ئۆيىدە ئېلىپ بېرىلىپ ، سىناقتىن بۇرۇن ئۈستەل تازىلاندى.
تەجرىبە جەريانىدا بىر قېتىم ئىشلىتىلىدىغان پەلەي ۋە ماسكا تاقاپ ، RNase نىڭ بارلىققا كېلىشىدىن كېلىپ چىققان RNA نىڭ تۆۋەنلىشىنى ئازايتىڭ.
4. رېئاكتور ئىشلىتىش جەريانىدا RNase بىلەن بۇلغانغان.
تەۋسىيە: مۇناسىۋەتلىك تەجرىبە ئۈچۈن يېڭى ھايۋانلارنىڭ ئومۇمىي RNA ئايرىپ ساقلاش ئۈسكۈنىسىنى ئالماشتۇرۇڭ.
5. RNA كونترول قىلىشتا ئىشلىتىلىدىغان مەركەزدىن ياسالغان نەيچە ، كۆرسەتمە قاتارلىقلار RNase بىلەن بۇلغانغان.
تەۋسىيە: RNA ئېلىشتا ئىشلىتىلىدىغان مەركەزدىن ياسالغان تۇرۇبا ، كۆرسەتمە ، تۇرۇبا قاتارلىقلارنىڭ ھەممىسىنىڭ RNase-Free ئىكەنلىكىنى جەزملەشتۈرۈڭ.
ساپلاشتۇرۇلغان RNA تۆۋەن ئېقىندىكى سىناقلارغا تەسىر كۆرسىتىدۇ
RNA ساپلاشتۇرۇش تۈۋرۈكى ئارقىلىق ساپلاشتۇرۇلغان ، ئەگەر تۇز ئىئونى بولسا ، ئاقسىلنىڭ مىقدارى بەك كۆپ بولۇپ كەتسە تۆۋەنكى ئېقىن تەجرىبىسىگە تەسىر كۆرسىتىدۇ ، مەسىلەن: تەتۈر كۆچۈرۈلۈش ، شىمالىي Blot قاتارلىقلار.
1. چىقىرىۋېتىلگەن RNA نىڭ تۇز ئىئون قالدۇقى بار.
تەۋسىيە: بۇففېر RW2 غا توغرا مىقداردىكى ئېتانولنىڭ قوشۇلغانلىقىنى جەزملەشتۈرۈڭ ھەمدە مەشغۇلاتتا كۆرسىتىلگەن مەركەزدىن قاچۇرۇش سۈرئىتىدە 2 تازىلاش تۈۋرۈكى يۇيۇڭ.ئەگەر تۇز ئىئونى قالدۇقى بولسا ، تازىلاش تۈۋرۈكىنى Buffer RW2 غا 5 مىنۇت ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا قويۇپ ، مەركەزدىن قاچۇرۇپ ، تۇزنىڭ بۇلغىنىشىنى ئەڭ زور دەرىجىدە يوقىتىڭ.
2. چىقىرىۋېتىلگەن RNA دىكى ئېتانول قالدۇقى.
تەۋسىيە: بۇففېر RW2 يۇيۇلغاندىن كېيىن ، قۇرۇق تۇرۇبا مەركەزدىن قاچۇرۇش مەشغۇلاتىنى مەشغۇلاتتا كۆرسىتىلگەن مەركەزدىن قاچۇرۇش سۈرئىتىدە ئىجرا قىلىڭ ، ئەگەر ئېتانول قالدۇقى بولسا قۇرۇق تۇرۇبا مەركەزدىن قاچۇرۇش مەشغۇلاتىنى 2 مىنۇتقا ئۇزارتىڭ ، ياكى قۇرۇق تۇرۇبا مەركەزدىن كېيىن ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا 5 مىنۇت قويۇپ قويۇڭ ، ئېتانول قالدۇقىنى چىقىرىۋېتىڭ.