تونۇشتۇرۇش:

RNA ، ئىلمىي ئىسمى رىبونۇكلېئىك كىسلاتا ، ئۇنىڭ قىسقارتىلمىسى RiboNucleic كىسلاتاسىدىن كەلگەن ، فوسفودىئېستېر باغلىنىشى ئارقىلىق كەم دېگەندە ئون نەچچە رىبونۇكلېئوتىدنى تۇتاشتۇرۇش ئارقىلىق شەكىللەنگەن يادرو كىسلاتاسى.

RNA ئۈستىدە ئىزدىنىشنىڭ ئالدىنقى شەرتى بۇلغىنىشسىز ئومۇمىي RNA ئېلىش ، RNA ئېلىشنىڭ ئاساسىي پرىنسىپىنى تۆۋەندىكىدەك يىغىنچاقلاشقا بولىدۇ:

1. ئالدى بىلەن ھۈجەيرىلەرنى قالايمىقانلاشتۇرۇڭ

2. ئاندىن ماكرو مولېكۇلا ماددىلىرىنى (ئاقسىل ، ياغ ، DNA قاتارلىقلار) ئېلىڭ.

3. ئاخىرىدا ، تۇز ۋە ئورگانىك ئېرىتمىلەرنى چىقىرىۋەتكەندە ، RNA چۆكۈپ ، RNA نى تېخىمۇ ساپلاشتۇرىدۇ

ئېلىش ئۇسۇلىنىڭ ئۆتمۈشى ۋە بۈگۈنى

تۇنجى ئەۋلاد RNA ئېلىش ئۇسۇلى TRIzol يامغۇر يېغىش ئۇسۇلى (ئىشلىتىلگەن رېئاكتورلار پىئوتر چومچىنسكىي ۋە مومىسى نىكولېتتا ساچى ئىسىملىك ​​بوۋا كەشىپ قىلغان TRIzol يامغۇر يېغىش ئۇسۇلى (ئىشلىتىلگەن رېئاكتورلار گانىدىن ئىزوتىئوكيانات ، فېنول ، خلوروفورم قاتارلىقلارنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ) ، چۈنكى بۇ كەشپىيات RNA تەتقىقاتىنى تېز ۋە ئاسانلاشتۇرىدۇ.

كېيىن ، بوۋاي بۇ پاتېنتنى Invitrogen غا سېتىۋەتكەن ، Invitrogen بۇ ئۇسۇلنى دۇنياغا تەشۋىق قىلىپ ، كەڭ قوللىنىلغان ئۇسۇلغا ئايلانغان.

كېيىن ، Invitrogen تېرمو تەرىپىدىن سېتىۋېلىنغان!

ۋەكىللىك مەھسۇلات: Invitrogen نىڭ TRIzol رېئاكتورى

قانداقلا بولمىسۇن ، TRIzol يامغۇر يېغىش ئۇسۇلى كۆپ قېتىم يامغۇر يېغىش ۋە RNA ئېلىشنى تەلەپ قىلىدۇ ، ئىشلىتىلگەن رېئاكتور زەھەرلىك بولۇپ ، مەشغۇلات قىلىشقا ئۇزۇن ۋاقىت كېتىدۇ.

شۇڭلاشقا ، ئىككىنچى ئەۋلاد تۈۋرۈك ئېنزىمنى ساپلاشتۇرۇش ئۇسۇلى بارلىققا كەلگەن بولۇپ ، سىلىتسىي يىلىمى پەردىسىنى ئالاھىدە يادرو كىسلاتاسى سۈمۈرۈلۈش ماتېرىيالى قىلىپ ، باشقا بۇلغانمىلارنى چىقىرىۋەتكەندە ئەۋرىشكىدىكى RNA نىڭ ئەسلىگە كېلىشىنى ئەڭ زور دەرىجىدە ئاشۇرغان.

ئىككىنچى ئەۋلاد ئۇسۇل مۇقىم ئىقتىدار ئاساسىدا مەشغۇلاتنى ئاددىيلاشتۇرىدۇ ، خەتەر ئامىلىنى ئازايتىدۇ ۋە RNA ئېلىش ئۈنۈمىنى ئۆستۈرىدۇ.

ۋەكىللىك مەھسۇلاتلىرى: QIAGEN RNeasy ۋە كۆپىنچە دۆلەت ئىچى مەھسۇلاتلىرى

قانداقلا بولمىسۇن ، بىرىنچى ۋە ئىككىنچى ئەۋلاد ئۇسۇللار DNase ئارقىلىق DNA نىڭ بۇلغىنىشىنى يوقىتىشنى تەلەپ قىلىدۇ ، بۇ كېيىنكى تۆۋەن ئېقىندىكى سىناقلارغا بەزى قولايسىزلىقلارنى ئېلىپ كېلىدۇ.قالدۇق DNase تەتۈر كۆچۈرۈلۈش ئۈنۈمىنى تۆۋەنلىتىدۇ ۋە بىرىنچى قاتاردىكى cDNA بىرىكتۈرۈشنى ئازايتىدۇ ، بۇ ئارقىلىق نەتىجىنىڭ توغرىلىقىغا تەسىر كۆرسىتىدۇ.

شۇڭلاشقا ، ئۈچىنچى ئەۋلاد ئېلىش ئۇسۇلى ئىككىنچى ئەۋلاد ئاساسىدا ئەلالاشتۇرۇلغان.سىناقتا ھېچقانداق ئېنزىم قوشۇشنىڭ ھاجىتى يوق ، پەقەت ئىككى ئىستون بىلەنلا RNA غا ئېرىشكىلى بولىدۇ.

1-ستون: DNA نى تازىلاش ستون

2-ستون: پەقەت RNA بولغان ستون مەخسۇس ئېلانلارنى ئېلان قىلىدۇ ۋە RNA نى ئەسلىگە كەلتۈرىدۇ

بۇنداق ئاددىي مەشغۇلات ۋاقىتنى تېجەپلا قالماي ، يەنە تۆۋەن ئېقىندىكى سىناقلارنىڭ مەشغۇلاتىنى ئاسانلاشتۇرىدۇ!

ۋەكىللىك مەھسۇلاتلىرى: QIAGEN RNeasy Plus ۋەForegeneRNA تازىلاش يۈرۈشلۈك مەھسۇلاتلىرى

E RNeasy Plus）

（Foregene'sئۆسۈملۈك ئومۇمىي RNA ئايرىمىسى Kit）

جىمجىت ئېيتقىن!Foregene نىڭ RNA يۈرۈشلۈك زاپچاسلىرى يەنە ئىشلىتىشكە قۇلايلىق بولغان RNase Eraser نى ئوتتۇرىغا قويدى ، ئۇ ئادەم بەدىنىگە ھېچقانداق زەھەرلىك ماددىلارنى قوشماي تۇرۇپ ، 1 مىنۇتتا قاتتىق يەر يۈزىدىكى 400μg RNase نى پۈتۈنلەي چىقىرىپ تاشلىيالايدۇ!

Pic1: مەشغۇلات جەريانىنى سېلىشتۇرۇش جەدۋىلى

Foregene نىڭ مەھسۇلاتلىرى پەقەت ئىككى ناخشىدا RNA ئېلىشنى تاماملىيالايدۇ ، باشقىلارنى تەجرىبە ئىلگىرىلىشىڭىزگە ھەسەت قىلماڭ!

Pic2:Experimental results سېلىشتۇرۇش جەدۋىلى

بىرىنچى ئەۋلاد (1: TRIzol)

ئىككىنچى ئەۋلاد (2: QIAGEN نىڭ RNeasy)

ئۈچىنچى ئەۋلاد (3: QIAGEN نىڭ RNeasy plus ، 4: Foregene)

Pic3: qPCR گرافىك (كۈچەيتمە ئەگرى سىزىق)

بىرىنچى ئەۋلاد (يېشىل دېگەنلىك TRIzol - ، قىزىل دېگەنلىك TRIzol +)

ئىككىنچى ئەۋلاد (ئاسمان كۆك دېگەن QIAGEN RNeasy- ، قىزىل بولسا QIAGEN RNeasy +)

ئۈچىنچى ئەۋلاد (كۆك QIAGEN RNeasy plus ، يېشىل دېگەن مەنىنى بىلدۈرىدۇ)

.

ھەر بىر تېخنىكىلىق يېڭىلاش تەجرىبىنىڭ مەشغۇلاتىنىڭ تېخىمۇ ئاددىي ۋە تېخىمۇ قۇلايلىق بولغان يۆنىلىشتە تەرەققىي قىلىۋاتقانلىقىدىن دېرەك بېرىدۇ.

Foregene تېخىمۇ كۆپ ئىلمىي تەتقىقاتچىلارنىڭ تەجرىبە ۋاقتى ۋە تەننەرخىنى تېجەپ ، يۇقىرى سۈپەتلىك تەجرىبە نەتىجىسىنى قولغا كەلتۈرۈشىگە ۋە تېخىمۇ قىممەتلىك ئىلمىي تەتقىقات مۇۋەپپەقىيەتلىرىنى يارىتىشقا ياردەم قىلىشنى مەقسەت قىلىدۇ.