ئىشىنىمەنكى ، PCR رېئاكسىيە قىلغاندا ھەممە ئادەم دائىم مۇشۇنداق ياكى مۇشۇنداق مەسىلىلەرگە دۇچ كېلىدۇ ، ئەمما ئۇلارنىڭ كۆپىنچىسى ئىككى چوڭ مەسىلىگە بۆلىنىدۇ:

گېن قېلىپىنى كېڭەيتىش بەك كىچىك (كۈچەيتىش)
نىشانسىز گېن كۆپەيتىش بەك كۆپ.
خۇرۇچ ئىشلىتىش بۇ مەسىلىلەرنى ھەل قىلىدىغان ئورتاق ئىستراتېگىيىنىڭ بىرى.ئادەتتە خۇرۇچلارنىڭ رولى مۇنداق ئىككى تەرەپنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ:
ئىككىلەمچى قۇرۇلماگېنلارنىڭ (ئىككىلەمچى قۇرۇلمىسى)
كونكرېت بولمىغان ئىپتىدائىيلىقنى ئازايتىڭ.
بۈگۈن ، تەھرىرلىگۈچ سىزگە PCR ئىنكاسىدىكى ئورتاق خۇرۇچلار ۋە ئۇلارنىڭ ئىقتىدارلىرىنى قىسقىچە تونۇشتۇرىدۇ.
ئىككىلەمچى قۇرۇلمىنى ئازايتىدىغان خۇرۇچلار
sulfoxide(DMSO)
گېن ئەۋرىشكىسىيۇقىرى GC مەزمۇنى بىلەن.قانداقلا بولمىسۇن ، DMSO يەنە Taq پولىمېرازا پائالىيىتىنى زور دەرىجىدە ئازايتىدۇ.شۇڭلاشقا ، كۆپچىلىك قېلىپنىڭ قولايلىقلىقى ۋە پولىمېرازا پائالىيىتىنى تەڭپۇڭلاشتۇرۇشى كېرەك.تەھرىرى سىزنىڭ تەجرىبىڭىزگە ماس كېلىدىغان قويۇقلۇقىنى تېپىش ئۈچۈن DSMO نىڭ ئوخشىمىغان قويۇقلۇقىنى% 2 تىن% 10 كىچە سىناپ بېقىشىڭىزنى تەۋسىيە قىلىدۇ.
ئىئونسىز يۇيۇش سۇيۇقلۇقى
ئىئون بولمىغان يۇيۇش سۇيۇقلۇقى ، مەسىلەن% 0.1-1 Triton X-100 ، 20 ياكى NP-40 ئارىلىقىدا ، ئادەتتە DNA ئىككىلەمچى قۇرۇلمىسىنى ئازايتىدۇ.گەرچە بۇ قېلىپ گېنىنىڭ كۈچەيتىلىشىنى ئاشۇرالايدىغان بولسىمۇ ، ئەمما ئۇ ئالاھىدە بولمىغان كېڭەيتىش ئاۋارىچىلىقىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.شۇڭا ، بۇ خۇرۇچلار ئەخلەتسىز PCR رېئاكسىيەسى ئۈچۈن ياخشى ئۈنۈم بېرىدۇ ، ئەمما نىسبەتەن ناچار بولغان PRC ئىنكاسى ئۈچۈن ئۇنچە ياخشى ئەمەس.ئىئونسىز يۇيۇش سۇيۇقلۇقىنىڭ يەنە بىر پايدىسى SDS نىڭ بۇلغىنىشىنى ئازايتىش.ئادەتتە DNA ئېلىش جەريانىدا SDS PCR باسقۇچىغا ئېلىپ كېلىنىدۇ ، بۇ پولىمېرازانىڭ پائالىيىتىنى زور دەرىجىدە چەكلەيدۇ.شۇڭلاشقا ، رېئاكسىيەگە% 0.5 لىك Tween-20 ياكى Tween-40 نى قوشقاندا SDS نىڭ پاسسىپ تەسىرىنى نېيتراللاشتۇرغىلى بولىدۇ.
Betaine_
Betaine ئىككىلەمچى قۇرۇلمىنىڭ شەكىللىنىشىنى ئازايتىش ئارقىلىق DNA نىڭ كۈچەيتىلىشىنى ياخشىلايدۇ ، ئادەتتە سودا PCR زاپچاسلىرىغا «سىر» قوشۇلىدۇ.ئەگەر سىز betaine نى ئىشلەتمەكچى بولسىڭىز ، betaine ياكى betaine mono-hydrate (Betaine ياكى Betaine mono-hydrate) نى قويۇشىڭىز كېرەك ، ئەمما betaine ھىدروخلورىد (Betaine HCl) ئەمەس ، ئەڭ ئاخىرقى قويۇقلۇقى 1-1.7M غا تەڭشىلىشىڭىز كېرەك.Betaine مۇ كونكرېتلىقنى ياخشىلاشقا ياردەم بېرەلەيدۇ ، چۈنكى ئۇ DNA ئېرىتىش / DNA ئايرىشنىڭ ئاساسى جۈپ تەركىبىگە باغلىقلىقىنى يوقىتىدۇ.
كونكرېت بولمىغان ئىپتىدائىي ماددىلارنى ئازايتىدىغان خۇرۇچلار
Formamide
فورمامىد كۆپ ئىشلىتىلىدىغان ئورگانىك PCR خۇرۇچى.ئۇ DNA دىكى ئاساسلىق ئۆستەڭ ۋە كىچىك ئۆستەڭ بىلەن بىرىكىپ ، بۇ ئارقىلىق ئۇستاز DNA قوش خىلىتنىڭ مۇقىملىقىنى تۆۋەنلىتىدۇ ۋە DNA نىڭ ئېرىش تېمپېراتۇرىسىنى تۆۋەنلىتىدۇ.PCR تەجرىبىسىدە ئىشلىتىلگەن فورمادنىڭ قويۇقلۇقى ئادەتتە% 1-% 5 بولىدۇ.
Tetramethylئاممونىي خلورىد( TMAC)
Tetramethylammonium خىلورىد بىرىكتۈرۈش (ئارىلاشتۇرۇش ئالاھىدىلىكى) نىڭ ئالاھىدىلىكىنى ئاشۇرۇپ ، DNA نىڭ ئېرىش تېمپېراتۇرىسىنى ئاشۇرالايدۇ.شۇڭا ، TMAC ئالاھىدە بولمىغان ئىپتىدائىي ماددىلارنى چىقىرىپ تاشلاپ ، DNA ۋە RNA نىڭ خاتا باغلىنىشىنى ئازايتالايدۇ.ئەگەر ئىشلەتسىڭىزبۇزۇلغان پىرىماتلارPCR ئىنكاسىدا ، ئادەتتە 15-100mM قويۇقلۇقىدا ئىشلىتىلىدىغان TMAC نى قوشۇشنى ئۇنتۇپ قالماڭ.
باشقا كۆپ ئۇچرايدىغان خۇرۇچلار
يۇقىرىدا تىلغا ئېلىنغان ئىككى تۈردىكى خۇرۇچتىن باشقا ، PCR ئىنكاسىدا كۆپ ئۇچرايدىغان خۇرۇچلار بار ، گەرچە ئۇلارنىڭ ئىقتىدارى ئوخشاش بولمىسىمۇ ، ئۇلارمۇ ئىنتايىن مۇھىم.
ماگنىي ئىئونى
ماگنىي ئىئونى پولىمېرازانىڭ كەم بولسا بولمايدىغان كوفاكتورى (كوفاكتور) ، يەنى ماگنىي ئىئونى بولمىسا ، پولىمېرازا ئاكتىپ بولمايدۇ.قانداقلا بولمىسۇن ، ماگنىي ئىئونى بەك كۆپ بولۇپ كەتسە ، پولىمېرانىڭ ئۈنۈمىگە تەسىر كۆرسىتىدۇ.ھەر PCR ئىنكاسىدىكى ماگنىي ئىئوننىڭ قويۇقلۇقى ئوخشىمايدۇ.خىلىتلاش دورىسى (EDTA ياكى سېتراتقا ئوخشاش) ، DNTP ۋە ئاقسىلنىڭ قويۇقلۇقى ماگنىي ئىئوننىڭ قويۇقلۇقىغا تەسىر كۆرسىتىدۇ.شۇڭا ، ئەگەر PCR تەجرىبىڭىزدە مەسىلىگە يولۇقسىڭىز ، ئوخشىمىغان ماگنىي ئىئون قويۇقلۇقىنى ئۆزگەرتسىڭىز بولىدۇ ، مەسىلەن 1.0 دىن 4.0mM غىچە ، ئارىلىقى 0.5-1mM.
دىققەت قىلىشقا ئەرزىيدىغىنى شۇكى ، كۆپ خىل توڭ ئېرىتىش دەۋرى ماگنىي خىلور ئېرىتمىسىنىڭ قويۇقلۇقىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.شۇڭلاشقا ، ئۇنى ھەر قېتىم ئىشلىتىشتىن بۇرۇن چوقۇم تولۇق ئېرىتىپ ، ئىشلىتىشتىن بۇرۇن ياخشى ئارىلاشتۇرۇڭ.
كالا قان زەردابى پىلاستىنكىسى(Bovine albumin, BSA)
مولېكۇلا خىمىيىلىك تەجرىبىسىدە ، كالا قان زەردابى پىلاستىنكىسى ناھايىتى كۆپ ئۇچرايدىغان خۇرۇچ ، بولۇپمۇ چەكلەش فېرمېنتى ھەزىم قىلىش ۋە PCR تەجرىبىسىدە.PCR ئىنكاسىدا ، BSA فېنول بىرىكمىسى قاتارلىق بۇلغىمىلارنى ئازايتىشقا پايدىلىق.شۇنداقلا ئۇ رېئاكتورنىڭ سىناق نەيچىسىنىڭ تېمىغا چاپلىشىشىنى ئازايتالايدۇ دېيىلگەن.PCR ئىنكاسىدا ، ئادەتتە BSA قوشۇلغان قويۇقلۇقى 0.8 mg / ml غا يېتىدۇ.
 
مۇناسىۋەتلىك مەھسۇلاتلار:
PCR Hero(بوياق بىلەن)
PCR Hero