RNase بىر خىل سەزگۈر سۆز بولۇپ ، دائىم RNA ئېلىش تەجرىبىسى ئېلىپ بارىدىغان نۇرغۇن ئوقۇغۇچىلار ئاڭلاشنى خالىمايدۇ.تولۇق قوراللانغان ، ئاخىرىدا ئىنتايىن زەھەرلىك رېئاكتور فېنول ۋە خلوروفورم بىلەن ئېلىنغان RNA بۇزۇلدى.مەن ياراشمىدىم!!!بۈگۈن بىز داڭلىق Rnase نىڭ كېلىپ چىقىشىنى كۆرۈپ باقايلى.

Ribonuclease (RNase) ياكى RNase بولسا RNA نى كىچىك مولېكۇلاغا ئايلاندۇرالايدىغان يادرو.RNase كىچىك مولېكۇلا ئاقسىلى بولۇش سۈپىتى بىلەن ئادەتتىن تاشقىرى مۇقىم .ئادەتتىكى يۇقىرى تېمپېراتۇرا ۋە يۇقىرى بېسىملىق پارنى مىكروبسىزلاندۇرۇش ۋە ئاقسىلنى تىزگىنلىگۈچىلەر ئۇنى پۈتۈنلەي قوزغىتالمايدۇ.RNase نىڭ مۇقىملىقى ئاساسلىقى قۇرۇلمىدىكى گۈڭگۈرتسىز زايومدىن كېلىدۇ.مەسىلەن ، كۆپ ئىشلىتىلىدىغان كالا ئاشقازان ئاستى بېزىدىكى RNase نىڭ ئاران 124 خىل ئامىنو كىسلاتاسى بار ، ئەمما 4 خىل دېسففىدلىق باغلىنىش بار.گۈڭگۈرت زايومى ۋە گۈڭگۈرتسىز زايوم RNase نى ناھايىتى ياخشى ئىسسىقلىق مۇقىملىقى بىلەن تەمىنلەيدۇ.ئۇنىڭدىن باشقا ، rnase نىڭ مولېكۇلا ئېغىرلىقى بىر قەدەر كىچىك بولۇپ ، نۇرغۇن ئەھۋاللاردا ئۇنىڭ ئەسلىدىكى ئۆزگىرىشىنى تېز ئەسلىگە كەلتۈرەلەيدۇ.

ئىنتايىن مۇقىم بولغاندىن باشقا ،RNases تەجرىبىخانىدا ھەممىلا جايدا بار .RNase بولسا بىئولوگىيىلىك مۇداپىئە مېخانىزمى.بىر ھۈجەيرىگە نىسبەتەن ، غەلىتە RNA ھەمىشە ئەجەللىك بولىدۇ.تاشقى مەنبەلىك DNA بىلەن سېلىشتۇرغاندا ، تاشقى RNA كۆپىنچە خەتەرلىك.RNA خۇشال ھالدا كۆچۈرۈلگەن ۋە تەرجىمە قىلىنغان ، شۇڭا بارلىق جانلىقلار دېگۈدەك RNases نى تەرەققىي قىلىپ ، تاشقى RNA نىڭ تاجاۋۇزىدىن مۇداپىئەلىنىش ئۈچۈن تەرەققىي قىلغان.شۇڭلاشقا ، تەجرىبىخانىدا يېتىشتۈرۈلگەن باكتېرىيە ھۈجەيرىلىرى ۋە سىز RNA نى چىقىرىدىغانلار RNase نىڭ پۇرىقىنى چىقىرىپ تاشلايدۇ.ئادەم بەدىنىدىكى سۇيۇقلۇقلار (شۆلگەي ، ياش قاتارلىقلار) تەركىبىدە كۆپ مىقداردا RNase بار ، شۇڭا RNA بۇزۇلغاندا يىغلىماڭ.قانچە يىغلىسىڭىز ، RNA نىڭ ناچارلىشىشى شۇنچە ناچار بولىدۇ!!دايۈ ئاچا-سىڭىل RNA ئېلىشقا ماس كەلمەيدۇ!

ئۇنىڭدىن باشقا ، نازۇك تېرىڭىزدە يەنە نۇرغۇنلىغان RNase بار ، تېرىگە تەگكەن بەلگە ، تۇرۇبا ، توڭلاتقۇ ئىشىكى ۋە ئىشىك تۇتقۇچلىرىدىمۇ RNase بار.

شۇنچە كۆپ ۋاراڭ-چۇرۇڭ بىلەن ، RNases نى قانداق بىر تەرەپ قىلىشنى كۆرۈپ باقايلى.

RNA نى چىقىرىۋەتكەندە ھەممەيلەن ئويلايدىغان بىرىنچى ئىشDEPC(diethyl pyrocarbonate).DEPC ئاساسلىقى ئاقسىلنى RNase ئاكتىپ گۇرۇپپا گىستودىننىڭ imidazole ھالقىسى بىلەن بىرلەشتۈرۈپ ، فېرمېنتنىڭ پائالىيىتىنى چەكلەيدۇ.% 0.1 DEPC Rnase غا تېخىمۇ ياخشى چىقىرىۋېتىش ئۈنۈمى بولىدۇ ، ئەمما بىز DEPC نىڭ مەلۇم راك پەيدا قىلغۇچى ماددا ئىكەنلىكىگە دىققەت قىلىشىمىز كېرەك ، شۇڭا ئۇنى ئىشلەتكەندە ئالاھىدە دىققەت قىلىش كېرەك.

RNase ئۈچۈن بىز ئىككى تەرەپتىن باشلىشىمىز كېرەك ،بىرىنچىسى ، ئىچكى مەنبەلىك RNase نىڭ پائالىيىتىنى چەكلەش

ترىزول تەركىبىدىكى گانىدىن ئىزوتىئوكيانات ۋە DTT قاتارلىق ئادەتتىكى RNA ئېلىش رېئاكتىۋلىرى RNase نىڭ دېسففىدلىق رىشتىنى ئاچالايدۇ ، ئەمما يەنىلا بىر قىسىم RNases بار ، بولۇپمۇ توقۇلمىلار ئەۋرىشكىسىدە ، شۇڭا تۆۋەن تېمپېراتۇرىغا دىققەت قىلىڭ.

1.توقۇلما ئەۋرىشكىسىنى چىقىرىۋەتكەندىن كېيىن دەرھال سۇيۇق ئازوتقا ياكى سودا RNA قوغداش ئېرىتمىسىگە چىلاپ قويۇڭ.

2.ھۈجەيرە ئەۋرىشكىسىنىڭ RNA نى چىقىرىۋەتكەندىن كېيىن ، ئۇنى لىز ئېرىتمىسىگە قوشۇپ مۇز ساندۇقىغا چاپلاڭ

3. ئۇۋۇلاش ئۈچۈن سۇيۇق ئازوت ئىشلىتىش ئەڭ ياخشى توقۇلمىلار ئەۋرىشكىسى ئوخشاش بولغاندا.سۇيۇق ئازوتسىز ئېلېكتر گېگېنوگېنېر ئىشلەتكەندە ، ئوخشاش ماسلاشتۇرغۇچنى تولۇق سوۋۇتۇشقا دىققەت قىلىڭ.

ئىككىنچى ، ئۆزلىكىدىن DNase

1.تولۇق قوراللىق بولۇڭ ، تەجرىبىخانا چاپان كىيىڭ ، ماسكا تاقاڭ ھەمدە بىر جۈپ يېڭى پەلەي كىيىشكە كاپالەتلىك قىلىڭ (ئۇنچە تېجەشلىك بولماڭ !! شۇنىڭغا دىققەت قىلىش كېرەككى ، ترىزولنىڭ چىرىتىشچانلىقى كۈچلۈك ، ئۇ پەلەي ئارقىلىقمۇ ناھايىتى كۈچلۈك ، شۇڭا قولىڭىزغا تامچىلىماڭ).

2.بارلىق ئىشلىتىلگەن تۇرۇبا ئۇلانمىلىرى ، EP تۇرۇبىسى ، PCR تۇرۇبىسى ۋە باشقا ئۈسكۈنىلەر چوقۇم RNase نى بىر تەرەپ قىلىشى كېرەك.ئۇنى% 0.1 DEPC غا چىلاپ ئاندىن يۇقىرى بېسىم ئاستىدا بېسىشقا بولىدۇ.ئىس-تۈتەكتىكى مەشغۇلاتقا دىققەت قىلىڭ.يەرلىك زالىملار فېرمېنتنى يوقىتىش ئۈچۈن ئىستېمال بۇيۇملىرىنى بىۋاسىتە سېتىۋالالايدۇ.

PS: سىزگە ھورۇن ئۇسۇلنى دەپ بېرەي.گەرچە يۇقىرى تېمپېراتۇرا ۋە يۇقىرى بېسىم RNase نى پۈتۈنلەي ئۆچۈرەلمىسىمۇ ، ئەمما ئۇنىڭ زور بىر قىسمىنى چىقىرىپ تاشلايدۇ.2 ھەسسە يۇقىرى تېمپېراتۇرا ۋە يۇقىرى بېسىمنىڭ ئۈنۈمى ياخشى ، RNA نى چىقىرىشنىڭ ئۈنۈمى ئاز.

3.ئىسپىرت ئاقسىلنى پەرقلەندۈرەلەيدۇ ،شۇڭا RNA ئېلىش جەدۋىلىنى% 75 ئىسپىرت بىلەن سۈرتكىلى بولىدۇ ، پەلەيگە يەنە ئىسپىرت پۈركۈشكە بولىدۇ.

4.ئەڭ ئاخىرقى RNA ئېرىتىش ئېرىتمىسى ۋە مەركەزدىن قاچۇرۇش نەيچىسىمۇ RNase نى داۋالاش كېرەك.DEPC سۈيى كۆپ ئىشلىتىلىدىغان RNA ئېرىتىش ئېرىتمىسى.DEPC سۈيىنىڭ توغرا تەييارلىق ئۇسۇلى توغرىسىدا سۆزلەپ ئۆتەيلى (سېتىۋالغاندا سودا DEPC نى قايتا قاچىلاشنى ئۇنتۇپ قالماڭ)

1: 1000 دە ئۇلترا سۇغا DEPC نى قوشۇڭ ، ئوبدان سىلكىڭ ، 37 سېلسىيە گرادۇستا بىر كېچە تۇرغۇزۇڭ ، يۇقىرى تېمپېراتۇرا ۋە يۇقىرى بېسىم ئاستىدا 121 سېلسىيە گرادۇستا 15 مىنۇت تۇرغۇزۇڭ.DEPC سۈيىنى -20 سېلسىيە گرادۇستا 1ml ئالكوكتا ساقلىغىلى بولىدۇ.

ئاخىرىدا خۇلاسىلەپ ئېيتقاندا: تۆۋەن تېمپېراتۇرا ئاچقۇچ ، ئىستېمال بۇيۇملىرى ياخشى بىر تەرەپ قىلىنىدۇ ، تولۇق قوراللانغان ۋە پاراڭلىشىش ئاز!

ياخشى ، بۇ بۈگۈنكى ئىستراتېگىيىمىز ئۈچۈن.سىز تىلغا ئالغان بارلىق RNA نىڭ قويۇقلۇقى ۋە ساپلىقىغا تىلەكداشمەن.A260 / A280 ھەر ئىككىسى 2.0!!!

ئەلۋەتتە ، ئەگەر سىز ئائۆي تېمپېراتۇرىسى مەشغۇلاتى RNA ئېلىش زاپچىسى، يۇقارقى ئاۋارىچىلىكلەرگە يولۇقماسلىقىڭىز مۇمكىن.

ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا مەشغۇلات قىلىش ، DNase نى قوشماي ، 11 مىنۇتتا ھۈجەيرىلەردىن RNA نى چىقىرىپ ، 30 مىنۇتتا ھايۋان توقۇلمىلىرى ياكى ئۆسۈملۈكلەردىن ئومۇمىي RNA ئالىدۇ.

سىناق ئەۋرىشكىسى ئۈچۈن ئالاقىلىشىڭ:overseas@foregene.com

مۇناسىۋەتلىك مەھسۇلاتلار:

https://www.foreivd.com/cell-total-rna-isolation-kit-product/

https://www.foreivd.com/animal-total-rna-isolation-kit-product/

https://www.foreivd.com/plant-total-rna/