قانچىلىك بىلىسىز

ھەققىدە N.سۈيدۈك كىسلاتاسى ئېلىش

ساپلاشتۇرۇلغان يادرو كىسلاتاسىنىڭ باشلىنىشى ۋە ئاخىرلىشىشى

باشتا ھەممە ئىش قىيىن ، ساپلاشتۇرۇلغان يادرو كىسلاتاسى ئەڭ كۆپ

مولېكۇلا تەجرىبىسىنىڭ باشلىنىشى ، كېيىنكى سىناقلار ئۈچۈن

مۇۋەپپەقىيەت ياكى مەغلۇبىيەت ھەل قىلغۇچ تەسىرگە ئىگە.

ئىز / ئۇلترا بىنەپشە نۇر سپېكترو فوتومېتىر نۇرغۇن ئىلمىي تەتقىقاتچىلارنىڭ ياقتۇرۇشىغا ئېرىشتى ، چۈنكى ئۇ يادرو كىسلاتاسىنىڭ قويۇقلۇقى ۋە ئاقسىل ۋە تۇز ئىئون قالدۇقىنى ئاددىي ، تېز ۋە ئىقتىسادىي جەھەتتىن بايقىيالايدۇ.

ھەممىمىزگە ئايان بولغىنىدەك ، A260 يادرو كىسلاتاسىنىڭ سۈمۈرۈلۈش OD قىممىتىنى ، A280 ئاقسىلنىڭ قويۇقلۇقى سۈمۈرۈلۈش OD قىممىتىنى ، A230 تۇز ئىئوننىڭ قويۇقلۇقى سۈمۈرۈلۈش OD قىممىتىنى كۆرسىتىدۇ ، شۇڭا A260 يادرو كىسلاتاسىنىڭ قويۇقلۇقىنى ئۆزگەرتەلەيدۇ ، A260 / 280 ئاقسىل قالدۇقىنى كۆرسىتىدۇ ، A260 / 230 تۇز ئىئون قالدۇقىنى كۆرسىتىدۇ ، ئەمما بۇ پەقەت تەتقىقاتچىلار تەرىپىدىن بايقالغان قائىدە.ئادەتتىكى»ئۇنىڭ DNA ۋە RNA نىڭ ساپلىقىنى چۈشەندۈرۈپ بېرەلەيدىغانلىقىغا ئىشىنىشمەلۇم دەرىجىدە.ئۇ يادرو كىسلاتاسىنىڭ مەھسۇلات مىقدارى ۋە ساپلىقىنى پەرقلەندۈرۈشتىكى بىردىنبىر ئۆلچەم ئەمەس ، ئۇ پەقەت پايدىلىنىش ماتېرىيالى سۈپىتىدە ئىشلىتىلىدۇ ، ئۇ «ئالتۇن ئۆلچەم» ئەمەس.

Thermo Fisher ND-2000 قوللانمىسى سىناق نەتىجىسىنىڭ ئىشەنچلىكلىكىنى تەكىتلەيدۇ

سەۋەبى ، مىكرو / ئۇلترا بىنەپشە نۇرلۇق ئۇلترا بىنەپشە نۇر سپېكترو فوتومومېتىر ئارقىلىق ئېرىشكەن نەتىجىلەر پەقەت يادرو كىسلاتاسىنىڭ مەھسۇلات ۋە ساپلىقىنى ئەكىس ئەتتۈرىدۇ ، ھەمدە نۇرغۇن تەسىر قىلىدىغان ئامىللار بار (ئوپتىكىلىق يول ، ئەۋرىشكە مىقدارى ، ئەۋرىشكە قويۇقلۇقى ، pH قىممىتى ، سۈمۈرۈلۈشنى ئۆلچەشكە تەسىر كۆرسىتىدىغان باشقا ئىئونلار) ، ئۆلچەنگەن OD قىممىتى چوقۇم توغرا بولۇشى ناتايىن.شۇنىڭ بىلەن بىر ۋاقىتتا ، سۈمۈرۈلۈش قىممىتىنى بەلگىلەش ماتېرىيالىنىڭ كونكرېت بولماسلىقى سەۋەبىدىن ، تاق لىنىيىلىك DNA ، قوش لىنىيىلىك DNA ، RNA ، DNTP ۋە بەزى ئاقسىللارنىڭ ھەممىسىنىڭ سۈمۈرۈلۈش يۇقىرى پەللىسى 260nm دولقۇن ئۇزۇنلۇقىدا ، پەقەت A260 بەلگىلىگەن قويۇقلۇقى ھەقىقىي DNA ياكى RNA بولۇشى ناتايىن.زېھنىنى مەركەزلەشتۈرۈش ، ئۇنىڭ پۈتۈنلۈكى ۋە تۆۋەنلىشىگە ھۆكۈم قىلىشقا بولمايدۇ.

ئۇنداقتا ساپلاشتۇرۇلغان يادرو كىسلاتاسىنىڭ سۈپىتىگە قانداق ھۆكۈم قىلىش كېرەك؟بايقاش ئۈچۈن مىكرو / ئۇلترا بىنەپشە نۇرلۇق ئۇلترا بىنەپشە نۇر سپېكترو فوتومومېتىرنى ئىشلەتكەندىن باشقا ، ئاگاروزا گېلى ئېلېكتروفورىسى قاتارلىق ئۇسۇللارمۇ يادرو كىسلاتاسىنىڭ ساپلىقى ۋە مۇكەممەللىكىنى كۆرۈنۈشتە نامايان قىلىشى ھەمدە قويۇقلۇقىنى مەلۇم دەرىجىدە كۆرسىتىشى كېرەك.بۇنداق بولغاندا ، ھەر خىل ئۇسۇللارنىڭ بايقاش نەتىجىسىدىن ئېرىشكەن يادرو كىسلاتاسىنىڭ مەھسۇلات مىقدارى ۋە ساپلىقى ئىشەنچلىك.

تەجرىبە جەدۋىلى سېلىشتۇرۇش

H1299 ھۈجەيرىسىنىڭ گېن DNA سى A شىركىتىنىڭ DNA ئېلىش زاپچاسلىرى ئارقىلىق ئېلىنغان بولۇپ ، كۆرۈنەرلىك بۇلغىنىش كۆرۈلگەن ، نەتىجىدە OD قىممىتى يۇقىرى بولغان

(OD ئۆلچەش قىممىتى ۋە ماس كېلىدىغان ئېلېكتروگرامما)

باھالاش كۆرسەتكۈچى

يادرو كىسلاتاسىنىڭ مەھسۇلات مىقدارى ۋە سۈپىتىنى سىناشتا «ئالتۇن ئۆلچەم» بارمۇ؟

بىلىشىمىزچە ، ئاددىي ، تېز ۋە ئەرزان ئۇسۇل يوق.مەيلى سپېكترو فوتومېتىر ، گېلى ئېلېكتروفورىسى ياكى ئاممىۋى سپېكترومىتىرى بولسۇن ، ھەممىسى ئوخشىمىغان تەرەپلەردىن ھەل قىلىش چارىسىدىكى يادرو كىسلاتاسىنىڭ قويۇقلۇقى ۋە ساپلىقىنى ئەكس ئەتتۈرىدۇ ، ئۇلار بىر-بىرىگە مۇراجىئەت قىلىش ئارقىلىق ھۆكۈم قىلىنىشى كېرەك.

ئەڭ ياخشى باھالاش كۆرسەتكۈچى ھەمىشەئىز قوغلاپ تەجرىبە قوللىنىش.ئۇ تەتۈر كۆچۈرۈش ۋە PCR كېڭەيتىش ئۈنۈمىگە تەسىر كۆرسەتمەيدۇ.ئىشەنچلىك كۈچەيتمە مەھسۇلات ۋە Ct قىممىتىگە ئېرىشىش ، ھەمدە تەرتىپ بويىچە تولۇق تەرتىپكە ئېرىشىش مۇۋەپپەقىيەتلىك يادرو كىسلاتاسىنى ئېلىش.

خۇلاسىلەپ ئېيتقاندا ، پەقەت نىسبەت نەزەرىيىسىنىڭ قارىشىغا «تۆۋەن ئېقىندىكى تەجرىبە نەتىجىسىنى ياخشى ئېلىش پارامېتىرى قىلىپ ئىشلىتىش» قارىشى بىلەن رىقابەتلىشىش كېرەك!

يۇقىرى DNA / RNA ساپلىقىغا ئېرىشىش ئۈچۈن تەۋسىيە قىلىنغان Foregene DNA RNA ئېلىش زاپچاسلىرى:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/