كاللامدىكى بايقاش تېخنىكىسى تارىخىدىكى بىر قانچە ئىنقىلابىي كەشپىيات ئانتىگېن ئانتىتېلاسىنى ئالاھىدە باغلاش ، PCR تېخنىكىسى ۋە تەرتىپلەش تېخنىكىسى پرىنسىپىنى ئاساس قىلغان ئىممۇنىتېتلاش تېخنىكىسى.بۈگۈن بىز PCR تېخنىكىسى ھەققىدە توختىلىمىز.PCR تېخنىكىسىنىڭ تەرەققىي قىلىشىغا ئاساسەن ، كىشىلەر PCR تېخنىكىسىنى ئادەتتىكى PCR تېخنىكىسى ، ھەقىقىي ۋاقىتتىكى فلۇئورېسسېنسىيە مىقدار PCR تېخنىكىسى ۋە رەقەملىك PCR تېخنىكىسىدىن ئىبارەت ئۈچ ئەۋلادقا ئايرىيدۇ.
Common PCR تېخنىكىسى
كارى موللىس (1944.12.28-2019.8.7)
كارى موللىس 1983-يىلى پولىمېرازا زەنجىرسىمان ئىنكاسىنى (پولىمېرازا زەنجىرسىمان ئىنكاسى ، PCR) كەشىپ قىلغان. ئېيتىشلارغا قارىغاندا ، ئۇ قىز دوستىنى ھەيدىگەندە تۇيۇقسىز ئىلھام چاقناپ ، PCR پرىنسىپى (ماشىنا ھەيدەشنىڭ پايدىسى توغرىسىدا) ئويلانغان.كارى مۇلىس 1993-يىلى نوبېل خىمىيە مۇكاپاتىغا ئېرىشكەن. «نيۇ-يورك ۋاقىت گېزىتى» بۇنىڭغا باھا بېرىپ: «ئىنتايىن ئەسلىي ۋە ئەھمىيەتلىك ، بىئولوگىيەنى PCR دىن بۇرۇنقى ۋە PCR دىن كېيىنكى دەۋرلەرگە ئايرىغىلى تاسلا قالدى.
PCR نىڭ پرىنسىپى: DNA پولىمېراسىنىڭ كاتالىزاتورى ئاستىدا ، ئانا تاياقچە DNA قېلىپ سۈپىتىدە ئىشلىتىلىدۇ ، كونكرېت كۆرسەتكۈچ كېڭەيتىشنىڭ باشلىنىش نۇقتىسى سۈپىتىدە ئىشلىتىلىدۇ ، قىزىنىڭ تاياقچە DNA تولۇقلىمىسى ئانا تاياقچە قېلىپ DNA نى تولۇقلاش ، يوقىتىش ، كېڭەيتىش ۋە باشقا باسقۇچلار ئارقىلىق ۋىرۇستا كۆچۈرۈلىدۇ.ئۇ ۋىرۇستىكى DNA بىرىكتۈرۈش كۈچەيتىش تېخنىكىسى بولۇپ ، ئۇ ۋىرۇستىكى ھەر قانداق نىشان DNA نى تېز ۋە ئالاھىدە كۈچەيتەلەيدۇ.
ئادەتتىكى PCR نىڭ ئەۋزەللىكى
1.كىلاسسىك ئۇسۇل ، مۇكەممەل خەلقئارا ۋە دۆلەت ئۆلچىمى
2.ئەسۋاب رېئاكتورىنىڭ تەننەرخى تۆۋەن
3.PCR مەھسۇلاتلىرىنى باشقا مولېكۇلا بىئولوگىيە تەجرىبىسى ئۈچۈن ئەسلىگە كەلتۈرگىلى بولىدۇ
تەۋسىيە قىلىنغان Foregene PCR ماشىنىسى: https://www.foreivd.com/foreamp-sn-695-series-thermal-cycler-96-wells-pcr-machine-product/
مۇناسىۋەتلىك مەھسۇلاتلار: https://www.foreivd.com/pcr-herotm-with-dye-product/
ئادەتتىكى PCR نىڭ كەمچىلىكى
1.بۇلغىنىش ئاسان
2.جاپالىق مەشغۇلات
3.پەقەت سۈپەت ئانالىزى
4.ئوتتۇراھال سەزگۈرلۈك
5.ئېنىق بولمىغان كۈچەيتكۈچ بار ، ئالاھىدە بولمىغان بەلۋاغ نىشان بەلۋاغ بىلەن ئوخشاش بولغاندا ، ئۇنى پەرقلەندۈرگىلى بولمايدۇ.
Capillary electrophoresis ئاساسىدىكى PCR
ئادەتتىكى PCR نىڭ كەمچىلىكىگە قارىتا ، بەزى ئىشلەپچىقارغۇچىلار قىل قان تومۇر ئېلېكتىرو فورمىسى پرىنسىپىغا ئاساسەن چالغۇلارنى ئوتتۇرىغا قويدى.قىل قان تومۇردا PCR كۈچەيتىلگەندىن كېيىنكى ئېلېكتروفورېز قەدىمى.سەزگۈرلۈك تېخىمۇ يۇقىرى ، بىر قانچە بازىنىڭ پەرقىنى پەرقلەندۈرگىلى ۋە كۈچەيتىشنى MAERKER ھېسابلىغىلى بولىدۇ.مەھسۇلات مەزمۇنى.كەمچىلىكى شۇكى ، PCR مەھسۇلاتىنى يەنىلا ئېچىش ۋە ئەسۋابقا سېلىش كېرەك ، بۇلغىنىش خەۋىپى يەنىلا چوڭ.
CapillaryElectrophoresis
2. ھەقىقىي ۋاقىتتىكى فلۇئورېسسېنسىيە مىقدار PCR (مىقدارلاشقان ھەقىقىي ۋاقىت PCR ، qPCR) تېخنىكىسىفلۇئورېسسېنسىيىلىك مىقدار PCR دەپمۇ ئاتىلىدۇ ، ئۇ ھەقىقىي ۋاقىت PCR دەپمۇ ئاتىلىدۇ ، ئۇ PE (Perkin Elmer) 1995-يىلى تەتقىق قىلىپ ياساپ چىققان يېڭى يادرو كىسلاتا مىقدار تېخنىكىسى.ئەگەر قىزىقسىڭىز ، ئۇنى تەكشۈرسىڭىز بولىدۇ.بۇ تېخنىكا ھازىر ئەڭ پىشقان ۋە كەڭ قوللىنىلغان يېرىم مىقدارلىق PCR تېخنىكىسى.
تەۋسىيە قىلىنغان qPCR ماشىنىسى: https: //www.foreivd.com/mini-real-time-pcr-system-forequant-sf2sf4-product/
فلۇئورېسسېن بوياش ئۇسۇلى (SYBR يېشىل I):SYBR يېشىل I مىقدار PCR ئۈچۈن ئەڭ كۆپ ئىشلىتىلىدىغان DNA باغلاش بوياق بولۇپ ، ئۇ ئالاھىدە بولمىغان قوش لىنىيىلىك DNA بىلەن باغلىنىدۇ.ئەركىن ھالەتتە ، SYBR Green ئاجىز فلۇئورېسسېنسىيە تارقىتىدۇ ، ئەمما قوش لىنىيىلىك DNA غا باغلانغاندىن كېيىن ، ئۇنىڭ فلۇئورېسسېنسىيىسى 1000 ھەسسە ئاشىدۇ.شۇڭلاشقا ، رېئاكسىيە تارقاتقان ئومۇمىي فلۇئورېسسېنسىيە سىگنالى ھازىرقى قوش لىنىيىلىك DNA نىڭ مىقدارىغا ماس كېلىدۇ ھەمدە كۈچەيتىلگەن مەھسۇلاتنىڭ ئېشىشىغا ئەگىشىپ كۆپىيىدۇ.بوياق مەخسۇس قوش لىنىيىلىك DNA بىلەن باغلانمىغاچقا ، يالغان ئاكتىپ نەتىجىلەر بارلىققا كېلىشى مۇمكىن.
مۇناسىۋەتلىك مەھسۇلاتلار: https://www.foreivd.com/real-time-pcr-easytm-sybr-green-i-kit-product/
فلۇئورېسسېنسىيە تەكشۈرۈش ئۇسۇلى (تاقمان تېخنىكىسى): مەزگىلىدەPCR كۈچەيتكۈچ ، بىر جۈپ پىرىسلاش بىلەن بىر ۋاقىتتا ئالاھىدە فلۇئورېسسېنسىيە تەكشۈرۈش ئەسۋابى قوشۇلغان.تەكشۈرۈش ئەسۋابى بىر سىزىقلىق ئولىگونوكلېئوتىد بولۇپ ، فلۇئورېسسېنسىيە مۇخبىرلار گۇرۇپپىسى ۋە فلۇئورېسسېنسىيە ئۆچۈرگۈچ گۇرۇپپىسىنىڭ ھەر ئىككى ئۇچىغا بەلگە قويۇلغان.تەكشۈرۈش ئەسۋابى مۇكەممەل بولغاندا ، مۇخبىر گۇرۇپپىسى تارقاتقان فلۇئورېسسېنسىيە سىگنالى ئۆڭكۈر گۇرۇپپىسى تەرىپىدىن سۈمۈرۈلىدۇ ، تەكشۈرۈشتە فلۇئورېسسېنسىيە سىگنالى يوقPCR كېڭەيتىش جەريانىدا (كېڭەيتىش باسقۇچىدا) ، Taq فېرمېنتىنىڭ 5'-3 'Dicer پائالىيىتى تەكشۈرۈش ئەسۋابىنى ھەزىم قىلىدۇ ۋە تۆۋەنلىتىدۇ ، شۇنداق قىلىپ مۇخبىر فلۇئورېسسېنسىيە گۇرۇپپىسى بىلەن ئۆچۈرگۈچى فلۇئورېسسېنسىيە گۇرۇپپىسى ئايرىلىدۇ ، شۇڭا فتور فېرمېنسىيىسىنى نازارەت قىلىش سىستېمىسى قوبۇل قىلىنىدۇ ، يەنى ھەر قېتىم DNA زەنجىرى كۈچەيگەندە ، فلۇئورېسسېنسىيە مولېكۇلاسى ھاسىل بولىدۇ.تاقمان تەكشۈرۈش ئۇسۇلى كلىنىكىلىق تەكشۈرۈشتە ئەڭ كۆپ قوللىنىلىدىغان بايقاش ئۇسۇلى.
مۇناسىۋەتلىك مەھسۇلاتلار: https://www.foreivd.com/quickeasy%e1%b5%80%e1%b4%b9-real-time-pcr-kit-taqman-product/
QPCR نىڭ ئەۋزەللىكى
1.بۇ ئۇسۇل پىشىپ يېتىلگەن ، ياردەمچى ئۈسكۈنىلەر ۋە رېئاكتورلار تولۇق
2.رېئاكتورنىڭ ئوتتۇرىچە باھاسى
3.ئىشلىتىش ئاسان
4.يۇقىرى سەزگۈرلۈك ۋە ئېنىقلىق
QPCR نىڭ كەمچىلىكى
نىشان گېنىنىڭ ئۆزگىرىشى يوقاپ كەتكەن بايقاشنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.
تۆۋەن قويۇقلۇقتىكى قېلىپنىڭ بايقاش نەتىجىسىنى ئېنىقلىغىلى بولمايدۇ.
مىقدارنى تەكشۈرۈشتە ئۆلچەملىك ئەگرى سىزىقنى ئىشلەتكەندە چوڭ خاتالىق بار.
3. رەقەملىك PCR (رەقەملىك PCR ، dPCR) تېخنىكىسى
رەقەملىك PCR يادرو كىسلاتا مولېكۇلاسىنى مۇتلەق مىقدارلاشتۇرۇشتىكى تېخنىكا.QPCR غا سېلىشتۇرغاندا ، رەقەملىك PCR DNA / RNA مولېكۇلا سانىنى بىۋاسىتە ئوقۇيالايدۇ ، بۇ باشلىنىش ئەۋرىشكىسىدىكى يادرو كىسلاتا مولېكۇلاسىنىڭ مۇتلەق مىقدارى.1999-يىلى ، بېرت ۋوگېلشتېين ۋە كېننىس W. Kin-zler dPCR ئۇقۇمىنى رەسمىي ئوتتۇرىغا قويدى.
2006-يىلى ، Fluidigm تۇنجى بولۇپ ئۆزەكنى ئاساس قىلغان dPCR ئەسۋابىنى ئىشلەپچىقارغان.2009-يىلى ، ھاياتلىق تېخنىكىسى OpenArray ۋە QuantStudio 12K Flex dPCR سىستېمىسىنى چىقاردى.2013-يىلى ، ھاياتلىق تېخنىكىسى QuantStudio 3DdPCR سىستېمىسىنى يولغا قويدى ، بۇ سىستېمىدا يۇقىرى زىچلىقتىكى نانوسكولى مىكرو تىپتىكى ئۆزەك تېخنىكىسى قوللىنىلىپ ، ئەۋرىشكە 20 مىڭ يەككە ھۈجەيرىگە تەكشى تارقىتىلدى.ئىنكاسى ياخشى.
2011-يىلى ، Bio-Rad تامچە ئاساس قىلىنغان QX100 dPCR ئەسۋابىنى چىقاردى ، بۇ سۇدا نېفىت تېخنىكىسى قوللىنىلىپ ، ئەۋرىشكىنى 20 مىڭ تامچە سۇغا تەكشى تەقسىملەيدۇ ھەمدە تامچە ئانالىزچى ئىشلىتىپ تامچىلارنى تەھلىل قىلىدۇ.2012-يىلى ، RainDance يۇقىرى بېسىملىق گازنىڭ تۈرتكىسىدە RainDrop dPCR قورالىنى يولغا قويۇپ ، ھەر بىر ئۆلچەملىك رېئاكسىيە سىستېمىسىنى 1 مىليوندىن 10 مىليونغىچە بولغان پېكولېتىر سەۋىيىسىدىكى مىكرو تامچە ئۆز ئىچىگە ئالغان رېئاكسىيە ئېمۇلسىيسىيىسىگە بۆلدى.
ھازىرغا قەدەر ، رەقەملىك PCR ئۆزەك تىپى ۋە تامچە تىپىدىن ئىبارەت ئىككى چوڭ گۇرۇپپىنى شەكىللەندۈردى.مەيلى قانداق رەقەملىك PCR بولۇشىدىن قەتئىينەزەر ، ئۇنىڭ يادرولۇق پرىنسىپلىرى كېڭىيىش ، ئاخىرقى نۇقتا PCR ۋە Poisson نىڭ تارقىتىلىشىنى چەكلەيدۇ.يادرو كىسلاتا قېلىپىنى ئۆز ئىچىگە ئالغان ئۆلچەملىك PCR رېئاكسىيە سىستېمىسى نەچچە ئون مىڭ PCR ئىنكاسىغا تەكشى بۆلۈنگەن بولۇپ ، بۇلار ئۆزەك ياكى مىكرو دولقۇنغا تارقىتىلغان ، شۇڭا ھەر بىر ئىنكاستا ئىمكانقەدەر قېلىپ مولېكۇلاسى بار ، يەككە مولېكۇلا قېلىپى PCR ئىنكاسى ئېلىپ بېرىلىدۇ.فلۇئورېسسېنسىيەنى ئوقۇش ئارقىلىق سىگنالنىڭ بار-يوقلۇقى ھېسابلىنىدۇ ، مۇتلەق مىقدار ستاتىستىكىلىق پويسون تەقسىماتنى تەڭشىگەندىن كېيىن ئېلىپ بېرىلىدۇ.
تۆۋەندىكىسى مەن ئىشلەتكەن بىر قانچە رەقەملىك PCR سۇپىسىنىڭ ئالاھىدىلىكى:
1. Bio-Rad QX200 تامچە رەقەملىك PCR Bio-RadQX200 ئىنتايىن كلاسسىك رەقەملىك PCR سۇپىسى ، ئاساسلىق بايقاش جەريانى: 20،000 ئەۋرىشكە تامچە گېنېراتور ئارقىلىق ھاسىل بولىدۇ.مەشغۇلات تېخىمۇ مۇرەككەپ ، بۇلغىنىش خەۋىپى ئوتتۇراھال.
Xinyi TD1 مىكرو تامچە رەقەملىك PCRشىنيسى TD1 دۆلەت ئىچىدىكى رەقەملىك PCR ئەسلىھەلىرى, ئاساسلىق بايقاش جەريانى: تامپۇن گېنېراتورىيە ئارقىلىق 30,000,000 مىڭ سۇ ئاستى-يېمەكلىك سەرپ قىلىشى, ئاخىرى تامچە ئوقۇغۇچنى ھەر بىر تامچە سۆزلەيدۇ, ئاخىرىدا تامچە ئوقۇغۇچنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.بۇ سۇپىدىكى تامچە ئەۋلادلار ۋە ئوقۇشلار بۇلغىنىش خەۋىپى تۆۋەن بولغان ئۆزەكتە ئېلىپ بېرىلىدۇ.
STILLA Naica مىكرو تامچە ئۆزەك رەقەملىك PCRSTILLA Naica بىر قەدەر يېڭى رەقەملىك PCR سۇپىسى.ئاساسلىق بايقاش جەريانى: ئۆزەككە ئىنكاس ھەل قىلىش چارىسىنى قوشۇش ، ئۆزەكنى مىكرو تامچە ھاسىل قىلىش ۋە كۈچەيتىش سىستېمىسىغا سېلىش ۋە 30،000 مىكرو تامچە ھاسىل قىلىش.ئۆزەكنىڭ ئۈستىگە تارقىتىلىدۇ ، ئۆزەكتە PCR كېڭەيتىش تاماملىنىدۇ.ئاندىن كۈچەيتىلگەن ئۆزەك مىكرو تامچە ئوقۇش ئانالىز سىستېمىسىغا يۆتكىلىدۇ ، رەسىمگە تارتىش ئارقىلىق فلۇئورېسسېنسىيە سىگنالى ئوقۇلىدۇ.پۈتكۈل جەريان يېپىق ئۆزەكتە ئېلىپ بېرىلىدىغان بولغاچقا ، بۇلغىنىش خەۋىپى تۆۋەن بولىدۇ.
4. ThermoFisher QuantStudio 3D ئۆزەك رەقەملىك PCR
ThermoFisher QuantStudio 3D يەنە بىر كىلاسسىك ئۆزەكنى ئاساس قىلغان رەقەملىك PCR سۇپىسى.ئۇنىڭ ئاساسلىق بايقاش جەريانى: تارقاتقۇچىغا رېئاكسىيە ھەل قىلىش چارىسىنى قوشۇش ، تارقاتقۇچى ئارقىلىق 20000 مىكرو دولقۇنلۇق رېئاكسىيە ئېرىتمىسىنى ئۆزەككە تەكشى يېيىش.، ئۆزەكنى PCR ماشىنىسىغا قويۇپ كۈچەيتىپ ، ئاخىرىدا ئۆزەكنى ئوقۇرمەنلەرگە سېلىپ رەسىمگە چۈشۈپ فلۇئورېسسېنسىيە سىگنالىنى ئوقۇڭ.مەشغۇلات بىر قەدەر مۇرەككەپ بولۇپ ، پۈتكۈل جەريان يېپىق ئۆزەكتە ئېلىپ بېرىلىدۇ ، بۇلغىنىش خەۋىپى تۆۋەن.
5. JN MEDSYS ئېنىقلىق ئۆزىكى رەقەملىك PCR
JN MEDSYS Clarity بىر قەدەر يېڭى ئۆزەك تىپىدىكى رەقەملىك PCR سۇپىسى.ئۇنىڭ ئاساسلىق بايقاش جەريانى: ئىلتىماس قىلغۇچىغا ئىنكاس ھەل قىلىش چارىسىنى قوشۇڭ ، ئىلتىماس قىلغۇچى ئارقىلىق PCR تۇرۇبىسىغا مۇقىملاشتۇرۇلغان 10،000 PCR تۇرۇبىسىغا ئىنكاس ھەل قىلىش چارىسىنى تەكشى تارقىتىڭ.مىكرو ئۆزەكتە ، رېئاكسىيە ئېرىتمىسى قىل قان تومۇر ھەرىكىتى ئارقىلىق ئۆزەككە كىرىدۇ ، ئۆزەك بىلەن PCR تۇرۇبىسى PCR ماشىنىسىغا قويۇلۇپ كۈچەيتىلىدۇ ، ئاخىرىدا ئۆزەك ئوقۇرمەنلەرگە سېلىنىپ ، سۈرەتكە تارتىش ئارقىلىق فلۇئورېسسېنسىيە سىگنالىنى ئوقۇيدۇ.مەشغۇلات تېخىمۇ مۇرەككەپ.بۇلغىنىش خەۋىپى تۆۋەن.
ھەر بىر رەقەملىك PCR سۇپىسىنىڭ پارامېتىرلىرى تۆۋەندىكىدەك يىغىنچاقلانغان:
رەقەملىك PCR سۇپىسىنىڭ باھالاش كۆرسەتكۈچى: بۆلۈنگەن ئورۇنلارنىڭ سانى ، فلۇئورېسسېنسىيە قانىلىنىڭ سانى ، مەشغۇلاتنىڭ مۇرەككەپلىكى ۋە بۇلغىنىش خەۋىپى.ئەمما ئەڭ مۇھىمى بايقاشنىڭ توغرىلىقى.رەقەملىك PCR سۇپىلىرىنى باھالاشنىڭ بىر ئۇسۇلى كۆپ خىل رەقەملىك PCR سۇپىسىنى ئىشلىتىپ بىر-بىرىنى دەلىللەش ، يەنە بىر ئۇسۇلى توغرا قىممەتتىكى ئۆلچەملىك ماددىلارنى ئىشلىتىش.
DPCR نىڭ ئەۋزەللىكى
1.مۇتلەق مىقدارلاشتۇرۇش
2.تېخىمۇ سەزگۈرلۈك ۋە ئېنىقلىق
3.تۆۋەن كۆپەيتىلگەن ئەۋرىشكىنى بايقىيالايدۇ
DPCR نىڭ كەمچىلىكى1. قىممەت باھالىق ئۈسكۈنىلەر ۋە رېئاكتورلار 2. مۇرەككەپ مەشغۇلات ۋە ئۇزۇن بايقاش ۋاقتى 3. تار بايقاش دائىرىسى
ھازىر ، ئۈچ ئەۋلاد PCR تېخنىكىسىنىڭ ئۆزىگە خاس ئەۋزەللىكى ۋە كەمچىلىكى بار ، ھەر بىرىنىڭ ئۆزىگە خاس قوللىنىشچان ساھەلىرى بار ، ئۇ بىر ئەۋلاد يەنە بىر ئەۋلادنى ئالماشتۇرىدىغان مۇناسىۋەت ئەمەس.تېخنىكىنىڭ ئۈزلۈكسىز تەرەققىي قىلىشى PCR تېخنىكىسىغا يېڭى ھاياتىي كۈچ ئاتا قىلدى ، ئۇ كەينى-كەينىدىن قوللىنىشچان يۆنىلىشنى ئاچالايدۇ ، يادرو كىسلاتاسىنى بايقاش تېخىمۇ قۇلايلىق ۋە توغرا بولىدۇ.
مەنبە: دوكتور يۈەن سىزنى سىناققا ئېلىپ بارىدۇ
تەۋسىيە قىلىنغان مەھسۇلاتلار:
يوللانغان ۋاقتى: 18-نويابىردىن 20-نويابىرغىچە
