بىۋاسىتە PCR ھايۋانات ياكى ئۆسۈملۈك توقۇلمىلىرىنى يادرو كىسلاتاسى ئالماي كېڭەيتىشكە بىۋاسىتە ئىشلىتىدىغان ئىنكاس.نۇرغۇن جەھەتتىن بىۋاسىتە PCR دائىملىق PCR غا ئوخشاش ئىشلەيدۇ

ئاساسلىق پەرقى بىۋاسىتە PCR دا ئىشلىتىلىدىغان ئىختىيارى بۇففېر ، ئەۋرىشكە يادرو كىسلاتاسى ئالماي تۇرۇپ بىۋاسىتە PCR ئىنكاسىغا ئۇچرايدۇ ، ئەمما فېرمېنتلارنىڭ بەرداشلىق بېرىش ئىقتىدارى ۋە بىۋاسىتە PCR ئىنكاسىغا قاتناشقان بۇففېرنىڭ ماسلىشىشچانلىقى ئۈچۈن مۇناسىپ تەلەپ بار.

گەرچە ئادەتتىكى ئەۋرىشكىلەردە ئازدۇر-كۆپتۇر PCR چەكلىگۈچ بولسىمۇ ، بىۋاسىتە PCR فېرمېنت ۋە بۇففېرنىڭ ھەرىكىتىدە يەنىلا ئىشەنچلىك كۈچەيتىشنى ئەمەلگە ئاشۇرالايدۇ.ئەنئەنىۋى PCR ئىنكاسى قېلىپ سۈپىتىدە يۇقىرى سۈپەتلىك يادرو كىسلاتاسىنى تەلەپ قىلىدۇ ، ئەگەر قېلىپتا ئاقسىل ۋە باشقا بۇلغانمىلار بولسا PCR ئىنكاسىنىڭ ئوڭۇشلۇق ئىلگىرىلىشىنى توسىدۇ.بىۋاسىتە PCR ھازىر مولېكۇلا دىئاگنوز قويۇش ساھەسىدىكى ئەڭ ئالقىشقا ئېرىشكەن تېخنىكىلارنىڭ بىرى.

01 بىۋاسىتە PCR ئەسلىدە ھايۋانات ۋە ئۆسۈملۈكلەرگە ئىشلىتىلگەن

بىۋاسىتە PCR نىڭ ئەڭ بالدۇر قوللىنىلىشى ھايۋانلارنىڭ ۋە ئۆسۈملۈكلەرنىڭ ساھەسىدە بولۇپ ، چاشقاننىڭ قېنى ، توقۇلمىلىرى ۋە چاچلىرى ، مۈشۈك ، توخۇ ، توشقان ، قوي ، كالا قاتارلىقلار ، ئۆسۈملۈك يوپۇرمىقى ۋە ئۇرۇقى قاتارلىقلار ، گېن توپلاش ، گېنى يۆتكەش ، پىلازما بايقاش ، گېن چەكلەش ئانالىزى ، DNA مەنبەسىنى پەرقلەندۈرۈش ، تۈرلەرنى پەرقلەندۈرۈش ، SNP تەھلىلى ۋە باشقا ساھەلەر.

بۇ ساھەدە بىر قىسىم ئورتاق ئالاھىدىلىكلەر بار ، يەنى نىشانلىق گېننىڭ مىقدارى بىر قەدەر يۇقىرى ، يادرو كىسلاتاسىنى چىقىرىش ئاۋارىچىلىك ، شۇڭا بىۋاسىتە PCR ۋاقىت تېجەپلا قالماي ، نەتىجىگە ئازراق تەسىر كۆرسىتىپلا قالماي ، يەنە تەننەرخنى تېجەپ قالالايدۇ.

كېسەللىك قوزغاتقۇچنى تەكشۈرۈشتە ئىشلىتىلىدىغان بىۋاسىتە PCR يېقىنقى يىللاردىكى مەسىلە ، بىر قىسىم PCR رېئاكتور ئىشلەپچىقارغۇچىلار يېڭىلىق يارىتىشتا بۇ يۆنىلىشتە نۇرغۇن كۈچ چىقاردى.بولۇپمۇ بۇ COVID-19 يۇقۇمىدا ، نۇرغۇنلىغان بايقاش مەھسۇلاتلىرى بازاردا پەيدا بولدى ، مەسىلەن SARS-CoV-2 يادرو كىسلاتاسىنى بايقاش زاپچىسى (Multiplex PCR فلۇئورېسسېنسىيە تەكشۈرۈش ئۇسۇلى) Foregene تەرىپىدىن تەتقىق قىلىنغان ۋە تەتقىق قىلىنغان بولۇپ ، ئۇ SARS-CoV-2 نېرۋا ھۈجەيرىسىدىكى SARS-CoV-2 يادرو كىسلاتاسىنى سۈپەتلىك بايقاشتا ئىشلىتىلىدۇ.

Foregene نورمال PCR تېخنىكىسىنى ئىشلىتىدىغان شىركەتلەرنىڭ بىرى ، نورمال ORF1ab ، N ، E ۋەvariant SARS-CoV-2 B.1.1.7 نەسەبى (ئەنگىلىيە) ، B.1.351 نەسەبى (ZA) ، B.1.617 نەسەبى (IND) ۋە P.1 نەسەبى (BR) قاتارلىق ئىنسانلارنىڭ بۇرۇن يۇتقۇنچاق ئۆسمىسى ياكى بوغماق ئۈچەي يەللىكىدىكى ئەۋرىشكە كىسلاتاسى.

02  بىۋاسىتە PCR غا ئېھتىياجلىق رېئاكتور

Sample Lysate

ئەۋرىشكە لاياتنى ئۆزىڭىز تەڭشىسىڭىز ياكى سېتىۋالسىڭىز بولىدۇ.ئوخشىمىغان ماركىدىكى لىزاتنىڭ تەركىبىدىكى ئوخشىماسلىق لەيلىمە ئىقتىدارنى پەرقلەندۈرىدۇ ، ئاندىن لەيلىمە ۋاقىت سەل ئوخشىمايدۇ.مەسىلەن ، ھايۋانلارنىڭ توقۇلمىلىرى ئەۋرىشكىسىنى تەييارلاش ئۈچۈن ، ئادەتتە 30 مىنۇت ياكى بىر كېچە لىمزى تەۋسىيە قىلىنىدۇ ، ۋىرۇسلارنىڭ لىز ئېرىتمىسى 3-10 مىنۇت ئارىلىقىدا.

PCR master mix

قىزىق قوزغىتىش DNA پولىمېراسىنى ئىشلىتىپ ئالاھىدە كۈچەيتىشنى كۈچەيتىش ۋە كۈچەيتىش ئىقتىدارىنى ئاشۇرۇش تەۋسىيە قىلىنىدۇ.بىۋاسىتە PCR نىڭ يادروسى يۇقىرى بەرداشلىق بېرەلەيدىغان پولىمېرازا.

ئەۋرىشكە تەركىبىدىكى DNA نىڭ كۈچىيىشىگە تەسىر كۆرسىتىدىغان زاپچاسلارنى يوقىتىش ياكى چەكلەش

ئەۋرىشكە لىزا ، ئاقسىل ، ياغ ۋە باشقا ھۈجەيرە ئەخلەتلىرى بىلەن بىر تەرەپ قىلىنغاندىن كېيىن ، بۇ ماددىلار PCR ئىنكاسىنى تورمۇزلايدۇ.شۇڭلاشقا ، بىۋاسىتە PCR بۇ ئامىللارنىڭ تەسىرىنى ئازايتىش ئۈچۈن مۇناسىپ ئېلىۋېتىش ياكى چەكلىگۈچ قوشۇشنى تەلەپ قىلىدۇ.

03  بىۋاسىتە PCR نىڭ بەش بىلىم نۇقتىلىرى توپلىمى

بىرىنچى ، بىۋاسىتە PCR تېخنىكىسى ھەر خىل بىئولوگىيىلىك ئەۋرىشكە ئۈچۈن بىۋاسىتە PCR تېخنىكىسى.بۇ تېخنىكىلىق شارائىتتا ، يادرو كىسلاتاسىنى ئايرىش ۋە ئېلىشنىڭ ھاجىتى يوق ، توقۇلما ئەۋرىشكىسىنى بىۋاسىتە ئوبيېكت قىلىپ ئىشلىتىش ، ھەمدە نىشانلىق گېننى قوشۇش PCR ئىنكاسىنى قىلىش.

ئىككىنچىدىن ، بىۋاسىتە PCR تېخنىكىسى ئەنئەنىۋى DNA قېلىپىنى كېڭەيتىش تېخنىكىسى بولۇپلا قالماي ، يەنە RNA قېلىپ تەتۈر كۆچۈرۈلگەن PCR نى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.

ئۈچىنچىسى ، بىۋاسىتە PCR تېخنىكىسى توقۇلما ئەۋرىشكىسىدە دائىملىق سۈپەتلىك PCR ئىنكاسىنى بىۋاسىتە ئىجرا قىلىپلا قالماستىن ، يەنە Real-Time qPCR ئىنكاسىنىمۇ ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ ، بۇ ئىنكاس سىستېمىسىنىڭ ئارقا كۆرۈنۈشكە قارشى فلۇئورېسسېنسېنغا ئارىلىشىش ئىقتىدارى ۋە ئىچكى مەنبەلىك فلۇئورېسسېنسىيەنىڭ قارشى تۇرۇش ئىقتىدارىنى يوقىتىشىنى تەلەپ قىلىدۇ.

تۆتىنچى ، بىۋاسىتە PCR تېخنىكىسى نىشانلانغان ئەۋرىشكىلەر پەقەت يادرو كىسلاتا قېلىپىنى قويۇپ بېرىشكە موھتاج ، ھەمدە PCR ئىنكاسىغا تەسىر يەتكۈزىدىغان ئاقسىل ، پولىساخارىد ، تۇز ئىئونى قاتارلىقلارنى ئېلىۋەتمەيدۇ.بۇ رېئاكسىيە سىستېمىسىدىكى يادرو كىسلاتاسى پولىمېرازا ۋە PCR ئارىلاشمىسىنىڭ ئېسىل قارشىلىق ۋە ماسلىشىشچانلىقىنى تەلەپ قىلىپ ، مۇرەككەپ شارائىتتا فېرمېنتنىڭ پائالىيىتى ۋە كۆپەيتىشنىڭ توغرىلىقىغا كاپالەتلىك قىلىدۇ.

بەشىنچى ، بىۋاسىتە PCR تېخنىكىسى نىشانلانغان توقۇلما ئەۋرىشكىسى ھېچقانداق يادرو كىسلاتاسىنى موللاشتۇرماي داۋالاش ئۇسۇلى ۋە قېلىپنىڭ مىقدارى ئىنتايىن ئاز ، بۇ ئىنكاس سىستېمىسىنىڭ ئىنتايىن سەزگۈرلۈك ۋە كۈچەيتىش ئۈنۈمىگە ئىگە بولۇشىنى تەلەپ قىلىدۇ.