مەسىلىلەرنى تەھلىل قىلىشقا يېتەكچىلىك قىلىدۇ

The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。

ھېچقانداق RNA چىقارغىلى بولمايدۇ ياكى يادرو كىسلاتاسىنىڭ مەھسۇلات مىقدارى تۆۋەن بولىدۇ

ئەسلىگە كەلتۈرۈش ئۈنۈمىگە تەسىر كۆرسىتىدىغان نۇرغۇن ئامىللار بار ، مەسىلەن: ئەۋرىشكە RNA مەزمۇنى ، مەشغۇلات ئۇسۇلى ، يوقىتىش مىقدارى قاتارلىقلار.

كۆپ ئۇچرايدىغان سەۋەبلەرنى تەھلىل قىلىش ：

1. مەشغۇلات جەريانىدا مۇنچا ياكى تۆۋەن تېمپېراتۇرا (4 سېلسىيە گرادۇس) مەركەزدىن قاچۇرۇش.

تەكلىپ: ئۆينىڭ تېمپېراتۇرىسى (15-25 سېلسىيە گرادۇس) مەشغۇلات ، ھەرگىز مۇز مۇنچىسى ۋە تۆۋەن تېمپېراتۇرا مەركەزدىن قاچۇرۇش.

2. ئەۋرىشكە ساقلاش ياكى ئەۋرىشكە ساقلاش ۋاقتى بەك ئۇزۇن.

تەكلىپ: ئەۋرىشكىلەرنى -80 سېلسىيە گرادۇستا ساقلاڭ ياكى سۇيۇق ئازوتتا توڭلىتىڭ ، قايتا-قايتا توڭلىتىشتىن ساقلىنىڭ.RNA ئېلىش ئۈچۈن يېڭى توپلانغان ئەۋرىشكىلەرنى ئىشلىتىپ بېقىڭ.

3. ئەۋرىشكە لايزىسى يېتەرلىك ئەمەس

تەۋسىيە: ئەۋرىشكە بىلەن خىزمەت ئېرىتمىسىنىڭ (سىزىقلىق ئاكرىلامىد) تولۇق ئارىلاشتۇرۇلۇپ ، ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا (15-25 سېلسىيە گرادۇس) 10 مىنۇت سىڭدۈرۈلگەنلىكىگە كاپالەتلىك قىلىڭ.

4. ئۈندىدار خاتا قوشۇلدى

تەۋسىيە: تازىلاش تۈۋرۈكىنىڭ پەردىسىنىڭ ئوتتۇرىسىغا RNase-Free ddH2O نىڭ قوشۇلغانلىقىغا كاپالەتلىك قىلىڭ

5. Buffer viRW2 دىكى سۇسىز ئېتانولنىڭ مىقدارى مۇۋاپىق ئەمەس

تەكلىپ: كۆرسەتمىگە ئەمەل قىلىڭ ، بۇففېر viRW2 غا توغرا مىقداردىكى سۇسىز ئېتانولنى قوشۇڭ ھەمدە زاپچاسنى ئىشلىتىشتىن بۇرۇن ياخشى ئارىلاشتۇرۇڭ。

6. مۇۋاپىق ئەۋرىشكە ئىشلىتىش.

تەكلىپ: باففېر viRL نىڭ 500μl ئەۋرىشكىسىدىن 200µl ئەۋرىشكە.ئەۋرىشكە مىقدارىنىڭ ھەددىدىن زىيادە ئېشىپ كېتىشى RNA ئېلىش نىسبىتىنى تۆۋەنلىتىدۇ.

7. مۇۋاپىق بولمىغان سۈزۈش مىقدارى ياكى تولۇق تولۇقلاش.

تەكلىپ: ساپلاشتۇرۇش تۈۋرۈكىنىڭ سۈزۈك ھەجىمى 30-50μl;ئەگەر يوقىتىش ئۈنۈمى قانائەتلىنەرلىك بولمىسا ، ئالدىن قىزىتىلغان RNase-Free ddH نى قوشۇش تەۋسىيە قىلىنىدۇ₂O ۋە ئۆينىڭ تېمپېراتۇرىسىغا قويۇش ۋاقتىنى ئۇزارتىڭ ، مەسىلەن 5-10 مىنۇت

8. ساپلاشتۇرۇش تۈۋرۈكى Buffer viRW2 دا چايقالغاندىن كېيىن ئېتانول قالدۇقى بار.

تەكلىپ: ئەگەر ئېتانول Buffer viRW2 دا يۇيۇلغاندىن كېيىن ۋە قۇرۇق تۇرۇبا مەركىزىدىن 2 مىنۇت تۇرغۇزۇلسا ، تازىلاش تۈۋرۈكىنى قۇرۇق نەيچە مەركەزدىن قاچۇرغاندىن كېيىن ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا 5 مىنۇت قويۇپ قويۇپ ، قالغان ئېتاننى تولۇق چىقىرىۋەتكىلى بولىدۇ.

ساپلاشتۇرۇلغان RNA مولېكۇلاسىنىڭ بۇزۇلۇشى

ساپلاشتۇرۇلغان RNA نىڭ سۈپىتى ئەۋرىشكە ساقلاش ، RNase بۇلغىنىش ۋە مەشغۇلات قاتارلىق ئامىللار بىلەن مۇناسىۋەتلىك.

كۆپ ئۇچرايدىغان سەۋەبلەرنى تەھلىل قىلىش ：

1. توپلانغان ئەۋرىشكەلەر ۋاقتىدا ساقلانمىدى.

تەكلىپ: ئەۋرىشكە يىغىپ بولغاندىن كېيىن ۋاقتىدا ئىشلىتىلمىسە ، دەرھال -80 at ياكى سۇيۇق ئازوتتا ساقلاڭ.RNA مولېكۇلاسىنى ئېلىش ئۈچۈن ، ئىمكانقەدەر يېڭى توپلانغان ئەۋرىشكىلەرنى ئىشلىتىپ بېقىڭ.

2. يىغىۋېلىنغان ئەۋرىشكەلەر قايتا-قايتا مۇزلاپ توڭلاتتى.

تەكلىپ: ئەۋرىشكە يىغىش ۋە ساقلاش جەريانىدا قايتا-قايتا مۇزلاش ۋە ئېرىتىشتىن ساقلىنىڭ (بىر قېتىمدىن ئېشىپ كەتمەيدۇ) ، بولمىسا يادرو كىسلاتاسىنىڭ مەھسۇلات مىقدارى تۆۋەنلەيدۇ.

3.RNase مەشغۇلات ئۆيىدە تونۇشتۇرۇلدى ياكى بىر قېتىم ئىشلىتىلىدىغان پەلەي ، ماسكا قاتارلىقلار تاقىمىدى.

تەكلىپ: RNA مولېكۇلا تەجرىبىسىنى ئېلىش ئەڭ ياخشىسى ئايرىم RNA مەشغۇلات ئۆيىدە ئېلىپ بېرىلىدۇ ، تەجرىبە ئۈستىلى سىناقتىن بۇرۇن تازىلىنىدۇ.تەجرىبە جەريانىدا بىر قېتىم ئىشلىتىلىدىغان پەلەي ۋە ماسكا تاقاپ ، RNase نىڭ تونۇشتۇرۇشىدىن كېلىپ چىققان RNA نىڭ بۇزۇلۇشىدىن ساقلىنىڭ.

4. ئىشلىتىش جەريانىدا رېئاكتور RNase تەرىپىدىن بۇلغانغان.

تەكلىپ: مۇناسىۋەتلىك تەجرىبىلەر ئۈچۈن يېڭى ۋىرۇس RNA يېگانە زاپچاسلىرىنى ئالماشتۇرۇڭ.

5. مەركەزدىن ياسالغان تۇرۇبا ، تۇرۇبا ئۇچى قاتارلىقلارنىڭ RNase بۇلغىنىشى تەكلىپ: مەركەزدىن ياسالغان تۇرۇبا ، تۇرۇبا ئۇچى ۋە تۇرۇبا يولىنىڭ ھەممىسىنىڭ RNase يوق بولۇشىغا كاپالەتلىك قىلىڭ.

ساپلاشتۇرۇلغان RNA مولېكۇلاسى تۆۋەن ئېقىن تەجرىبىسىگە تەسىر كۆرسەتتى

ساپلاشتۇرۇش تۈۋرۈكى ئارقىلىق ساپلاشتۇرۇلغان RNA مولېكۇلاسى تۇز ئىئونى ياكى ئاقسىل بەك كۆپ بولسا تۆۋەن ئېقىندىكى سىناقلارغا تەسىر كۆرسىتىدۇ ، مەسىلەن: تەتۈر كۆچۈرۈلۈش ، شىمالىي كۆك چىش قاتارلىقلار.

1. چىقىرىۋېتىلگەن RNA مولېكۇلاسىدا تۇز ئىئونلىرى قالدى.

تەۋسىيە: بۇففېر viRW2 غا توغرا مىقداردىكى سۇسىز ئېتانولنىڭ قوشۇلغانلىقىنى جەزملەشتۈرۈڭ ھەمدە مەشغۇلات كۆرسەتمىسىدىكى توغرا مەركەزدىن قاچۇرۇش سۈرئىتىگە ئاساسەن تازىلاش تۈۋرۈكىنى ئىككى قېتىم يۇيۇڭ ； ئەگەر تۇز ئىئونى قالغان بولسا ، بۇففېر viRW2 نى تازىلاش تۈۋرۈكىگە قوشسىڭىز بولىدۇ ، ھەمدە ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا 5 مىنۇت قويۇپ قويسىڭىز بولىدۇ.ئاندىن مەركەزدىن قاچۇرۇپ ، تۇز ئىئونىنىڭ بۇلغىنىشىنى ئەڭ زور دەرىجىدە چىقىرىۋېتىڭ

2. تاللانغان RNA مولېكۇلاسىدا ئېتانول قالدى

تەكلىپ: تازىلاش تۈۋرۈكىنىڭ Buffer viRW2 تەرىپىدىن چايقىۋېتىلگەنلىكىنى جەزملەشتۈرگەندىن كېيىن ، مەشغۇلات كۆرسەتمىسىدىكى مەركەزدىن قاچۇرۇش سۈرئىتىگە ئاساسەن قۇرۇق تۇرۇبا مەركەزدىن قاچۇرۇش ئېلىپ بېرىڭ.ئەگەر يەنىلا ئېتانول قالغان بولسا ، قۇرۇق نەيچە مەركەزدىن قاچقاندىن كېيىن ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا 5 مىنۇت قويۇپ قويۇپ ، قالغان ئېتاننى ئەڭ زور دەرىجىدە ئېلىۋەتكىلى بولىدۇ.

كۆرسەتمە قوللانمىسى:

ۋىرۇسلۇق RNA ئايرىۋېتىش قوللانمىسى قوللانمىسى