بۇ تەشكىلات تەرتىپ ئۇقۇمىنى ساقلاپ قالىدۇ: «ئىلمىي باشقۇرۇش ، يۇقىرى سۈپەتلىك ۋە ئۈنۈمنى ئالدىنقى ئورۇنغا قويۇش ، جۇڭگو ئىشلەپچىقارغۇچىلار ئۈچۈن سېتىۋالغۇچىلار ئەڭ يۇقىرى 2 × ساپلاشتۇرۇلمىغان ئەۋرىشكە ھەقىقىي ۋاقىت مىقدار PCR بىۋاسىتە كۆپ ئىقتىدارلىق Probe Qpcr Mix Plus U ، تىجارىتىمىز خېرىدارلارنى تاجاۋۇزچىلىق باھاسىدا مۇھىم ۋە بىخەتەر ئەلا سۈپەتلىك مەھسۇلاتلار بىلەن تەمىنلەشكە بېغىشلايدۇ.
بۇ تەشكىلات تەرتىپ ئۇقۇمىنى «ئىلمىي باشقۇرۇش ، يۇقىرى سۈپەتلىك ۋە ئۈنۈمنى ئالدىنقى ئورۇنغا قويۇش ، سېتىۋالغۇچىلار ئۈچۈن ھەممىدىن مۇھىمجۇڭگو تاك DNA پولىمېراسى ۋە Qpcrشىركىتىمىزنىڭ مول كۈچى بار ، مۇقىم ۋە مۇكەممەل سېتىش تورى سىستېمىسىغا ئىگە.بىز ئۆز-ئارا مەنپەئەت يەتكۈزۈش ئاساسىدا دۆلەت ئىچى ۋە سىرتىدىكى بارلىق خېرىدارلار بىلەن ساغلام سودا مۇناسىۋىتى ئورنىتىشىمىزنى ئۈمىد قىلىمىز.
ھەقىقىي ۋاقىت PCR دەسلەپكى لايىھىلەش پرىنسىپى

ئالغا ئىلگىرىلەش ۋە تەتۈر يۆنىلىشلىك كۆرسەتكۈچ

Real Time PCR ئۈچۈن دەسلەپكى لايىھىلەش ئىنتايىن مۇھىم.باشلانغۇچلار PCR كېڭەيتىشنىڭ كونكرېتلىقى ۋە ئۈنۈمى بىلەن مۇناسىۋەتلىك بولۇپ ، تۆۋەندىكى پرىنسىپلارغا ئاساسەن لايىھىلىگىلى بولىدۇ:

• دەسلەپكى ئۇزۇنلۇقى: 18-30bp.
• GC مەزمۇنى:% 40-60.
• Tm قىممىتى: Primer 5 غا ئوخشاش دەسلەپكى لايىھىلەش يۇمشاق دېتالى دەسلەپكى كۆرسەتكۈچنىڭ Tm قىممىتىنى بېرەلەيدۇ.يۇقىرى ئېقىن ۋە تۆۋەن ئېقىندىكى Tm قىممىتى ئىمكانقەدەر يېقىن بولۇشى كېرەك.Tm ھېسابلاش فورمۇلاسىنى ئىشلىتىشكە بولىدۇ: Tm = 4 ° C (G + C) + 2 ° C (A + T).PCR ئىجرا قىلغاندا ، تېمپېراتۇرا ° C5 تىن تۆۋەن تېمپېراتۇرا ئادەتتە تۇتاشتۇرۇش تېمپېراتۇرىسى قىلىپ تاللىنىدۇ (تۇتاشتۇرۇش تېمپېراتۇرىسىنىڭ ماس ھالدا ئۆسۈشى PCR ئىنكاسىنىڭ خاسلىقىنى ئاشۇرالايدۇ).
• Primers and PCR products:

1. لايىھىلەش دەسلەپكى PCR كېڭەيتىش مەھسۇلاتنىڭ ئۇزۇنلۇقى ئەڭ ياخشىسى 100-150bp.
2. قېلىپنىڭ ئىككىلەمچى قۇرۇلما رايونىدىكى لايىھىلەش باشلانغۇچلىرىنى ئىمكانقەدەر ساقلىنىش كېرەك.
3. يۇقىرى ئېقىن ۋە تۆۋەنكى ئېقىندىكى 3 ′ ئۇچى ئارىسىدا 2 ياكى ئۇنىڭدىن ئارتۇق تولۇقلاش ئاساسى شەكىللىنىشتىن ساقلىنىڭ.
4. Primer 3 ′ تېرمىنال ئاساسى ئۇدا 3 G ياكى C بىلەن بىللە بولمايدۇ.
5. پىرىمېرلارنىڭ ئۆزىدە قوشۇمچە قۇرۇلما بولالمايدۇ ، بولمىسا چاچ ياساش قۇرۇلمىسى شەكىللىنىپ ، PCR نىڭ كۈچىيىشىگە تەسىر كۆرسىتىدۇ.
6. دەسلەپكى تەرتىپتە ATCG نى ئىمكانقەدەر تەكشى تەقسىملەش ، 3 ′ تېرمىنال بازىسىدىن T دىن ساقلىنىش كېرەك.

قوشۇمچە1 ： C.ell DirectRT-qPCR Kit component تولۇقلىما بولىقى

1. Cell Lysis Solution

 بۇ تەشكىلات تەرتىپ ئۇقۇمىنى ساقلاپ قالىدۇ: «ئىلمىي باشقۇرۇش ، يۇقىرى سۈپەتلىك ۋە ئۈنۈمنى ئالدىنقى ئورۇنغا قويۇش ، جۇڭگو ئىشلەپچىقارغۇچىلار ئۈچۈن سېتىۋالغۇچىلار ئەڭ يۇقىرى 2 × ساپلاشتۇرۇلمىغان ئەۋرىشكە ھەقىقىي ۋاقىت مىقدار PCR بىۋاسىتە كۆپ ئىقتىدارلىق Probe Qpcr Mix Plus U ، تىجارىتىمىز خېرىدارلارنى تاجاۋۇزچىلىق باھاسىدا مۇھىم ۋە بىخەتەر ئەلا سۈپەتلىك مەھسۇلاتلار بىلەن تەمىنلەشكە بېغىشلايدۇ.
جۇڭگو ئىشلەپچىقارغۇچىجۇڭگو تاك DNA پولىمېراسى ۋە Qpcrشىركىتىمىزنىڭ مول كۈچى بار ، مۇقىم ۋە مۇكەممەل سېتىش تورى سىستېمىسىغا ئىگە.بىز ئۆز-ئارا مەنپەئەت يەتكۈزۈش ئاساسىدا دۆلەت ئىچى ۋە سىرتىدىكى بارلىق خېرىدارلار بىلەن ساغلام سودا مۇناسىۋىتى ئورنىتىشىمىزنى ئۈمىد قىلىمىز.

ھەقىقىي ۋاقىت PCR دەسلەپكى لايىھىلەش پرىنسىپى

ئالغا ئىلگىرىلەش ۋە تەتۈر يۆنىلىشلىك كۆرسەتكۈچ

Real Time PCR ئۈچۈن دەسلەپكى لايىھىلەش ئىنتايىن مۇھىم.باشلانغۇچلار PCR كېڭەيتىشنىڭ كونكرېتلىقى ۋە ئۈنۈمى بىلەن مۇناسىۋەتلىك بولۇپ ، تۆۋەندىكى پرىنسىپلارغا ئاساسەن لايىھىلىگىلى بولىدۇ:

• دەسلەپكى ئۇزۇنلۇقى: 18-30bp.
• GC مەزمۇنى:% 40-60.
• Tm قىممىتى: Primer 5 غا ئوخشاش دەسلەپكى لايىھىلەش يۇمشاق دېتالى دەسلەپكى كۆرسەتكۈچنىڭ Tm قىممىتىنى بېرەلەيدۇ.يۇقىرى ئېقىن ۋە تۆۋەن ئېقىندىكى Tm قىممىتى ئىمكانقەدەر يېقىن بولۇشى كېرەك.Tm ھېسابلاش فورمۇلاسىنى ئىشلىتىشكە بولىدۇ: Tm = 4 ° C (G + C) + 2 ° C (A + T).PCR ئىجرا قىلغاندا ، تېمپېراتۇرا ° C5 تىن تۆۋەن تېمپېراتۇرا ئادەتتە تۇتاشتۇرۇش تېمپېراتۇرىسى قىلىپ تاللىنىدۇ (تۇتاشتۇرۇش تېمپېراتۇرىسىنىڭ ماس ھالدا ئۆسۈشى PCR ئىنكاسىنىڭ خاسلىقىنى ئاشۇرالايدۇ).
• Primers and PCR products:

1. لايىھىلەش دەسلەپكى PCR كېڭەيتىش مەھسۇلاتنىڭ ئۇزۇنلۇقى ئەڭ ياخشىسى 100-150bp.
2. قېلىپنىڭ ئىككىلەمچى قۇرۇلما رايونىدىكى لايىھىلەش باشلانغۇچلىرىنى ئىمكانقەدەر ساقلىنىش كېرەك.
3. يۇقىرى ئېقىن ۋە تۆۋەنكى ئېقىندىكى 3 ′ ئۇچى ئارىسىدا 2 ياكى ئۇنىڭدىن ئارتۇق تولۇقلاش ئاساسى شەكىللىنىشتىن ساقلىنىڭ.
4. Primer 3 ′ تېرمىنال ئاساسى ئۇدا 3 G ياكى C بىلەن بىللە بولمايدۇ.
5. پىرىمېرلارنىڭ ئۆزىدە قوشۇمچە قۇرۇلما بولالمايدۇ ، بولمىسا چاچ ياساش قۇرۇلمىسى شەكىللىنىپ ، PCR نىڭ كۈچىيىشىگە تەسىر كۆرسىتىدۇ.
6. دەسلەپكى تەرتىپتە ATCG نى ئىمكانقەدەر تەكشى تەقسىملەش ، 3 ′ تېرمىنال بازىسىدىن T دىن ساقلىنىش كېرەك.

قوشۇمچە1 ： C.ell DirectRT-qPCR Kit component تولۇقلىما بولىقى

1. Cell Lysis Solution

كۆرسەتمە قوللانمىسى:

 تېز ئاسان ھۈجەيرە بىۋاسىتە RT-qPCR Kit-Taqman